24小时热门版块排行榜    

查看: 8925  |  回复: 15
本帖产生 2 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yesucao

木虫 (正式写手)

[求助] 琼脂糖凝胶电泳,跑的条带有点难看

这个是我酶切之后跑的电泳图,除了Marker和一个PCR的产物跑的条带是直线型的,怎么其他酶切的都好像跑的稍微有点快了??呈现那种所谓的微笑状,请各位虫虫帮忙分析一下原因。缓冲液?胶?还是本身质粒没有提好???
底下的小片段是目的条带,大小应该和PCR的产物是一样的大小,但是从图片上看的话就是要小一些。
之前因为RNA酶的问题,所以最近的几次提质粒都没有进行消化,图片有点难看,望各位见谅!!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesucao

木虫 (正式写手)

怎么办,怎么办???今天早上把所有电泳的东东洗了一遍,胶也凝固了2h,还是跑成昨天那样子。
有人建议调节电压的方法,实验室真的是达不到要求啊,老师们还在买槽子,一直没有回复啊,最近就只有我一个人用电泳槽,真的是很揪心啊!!我也不可以天天催着老师槽子的事情啊!!
14楼2011-08-14 15:03:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

1949stone: 恐怕不是 2011-08-13 20:14:17
yesucao(金币+1): 2011-08-13 22:47:10
微笑型条带是因为凝胶不均匀导致的哦,你看看是否药品失效,如凝胶催化剂,或者是你实验室温度太低了
做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
2楼2011-08-13 19:33:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yesucao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 416114799 at 2011-08-13 19:33:00:
微笑型条带是因为凝胶不均匀导致的哦,你看看是否药品失效,如凝胶催化剂,或者是你实验室温度太低了

如果按你所说的话,那除了PCR的产物,Marker,还有一个酶切的也是挺好的,只有最上面的一条带,也是直线型的,是否可以排除凝胶不均匀的情况???
凝胶的时间在30-40min。
实验室的小槽子坏了,我用的是28cm的大槽子,电压只能在75左右,电流在100mA,跑了1.5h,这个是否会成为可能的潜在因素???
3楼2011-08-13 20:25:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

416114799

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
amisking(金币+4, MolEPI+1): 鼓励应助 2011-08-13 21:29:51
yesucao(金币+4): 说的有道理,今后我会注意的 2011-08-13 22:49:40
引用回帖:
3楼: Originally posted by yesucao at 2011-08-13 20:25:20:
如果按你所说的话,那除了PCR的产物,Marker,还有一个酶切的也是挺好的,只有最上面的一条带,也是直线型的,是否可以排除凝胶不均匀的情况???
凝胶的时间在30-40min。
实验室的小槽子坏了,我用的是28cm的 ...

按理你其他都不会,那与电压也无关啊,要是电压有关系,全都这样了,这个更说不过去,不过你的电压也太小了,一般要在120以上,150以下会比较好。
我看你基本都是笑脸,这个与样品基本上没关系了,我还是认为与配胶有关。
另外,你拔梳子时也要注意,如果加样孔不规整,或梳子不干净引入了脏东西也是有可能的,你可以把梳子洗干净些,然后拔时快点,毕竟是DNA电泳,胶不平整我觉得很正常,如SDS电泳竖直的,有卡板,就比较少见。
做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
4楼2011-08-13 20:41:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 7/350 2026-11-13 10:55 by Equinoxhua
[考博] 27博士 +5 锦鲤送福至 2026-11-10 5/250 2026-11-13 06:22 by wlf1982
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +6 czAiolzR0IJC 2026-11-10 6/300 2026-11-12 16:55 by zzy933268
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:51 by ECLTXnJnRSXf
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 4/200 2026-11-12 12:51 by ECLTXnJnRSXf
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 6/300 2026-11-12 12:42 by ECLTXnJnRSXf
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 4/200 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 7/350 2026-11-12 11:22 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 Z7qfCsdIiD1T 2026-11-10 8/400 2026-11-12 11:20 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 czAiolzR0IJC 2026-11-10 8/400 2026-11-12 10:49 by HajghKOMynmz
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 G2rhSvqvhNzl 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:38 by HajghKOMynmz
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 C6CRn66RYYXS 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:16 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 YHiw1gou1Eda 2026-11-10 6/300 2026-11-12 10:14 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +6 FChKX8meu1ds 2026-11-09 11/550 2026-11-12 09:57 by HajghKOMynmz
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 FChKX8meu1ds 2026-11-09 10/500 2026-11-12 09:52 by HajghKOMynmz
[基金申请] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 TgvkbZZl9tqB 2026-11-11 5/250 2026-11-12 08:15 by HajghKOMynmz
[考博] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 9/450 2026-11-12 04:57 by 9fOTqj074tIg
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 7/350 2026-11-12 00:44 by 9fOTqj074tIg
[考博] 申请环境,微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
信息提示
请填处理意见