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至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 学习了! 2011-08-13 15:46:36
韩俊(金币+4): 谢谢你的详细解答,受教了 2011-08-14 12:58:39
蛋白质电泳影响因素非常多,我也提供一个想法,前提是你的各种药品都没有问题,尤其是APS和TEMED,这两个是导致胶凝固快慢的决定因素。
因为看到你整块胶都明显有染色颜色了,我想,可能与你的胶不均匀有关系,也就是说你下面的凝固得很快,但是上面的没有凝,导致胶不均匀。由此形成的孔径大小就不均匀,所以有些条带没有分开。一般凝胶是20~30分钟比较理想,我之前也搞得很晕,超过40分钟往往胶就不均匀,跑出来的带歪歪扭扭,有时也出现没有条带,凝胶时间太长不仅会影响均匀性,甚至连网孔都无法形成,丙烯酰胺→聚丙烯酰胺是形成网孔的过程。
如果你怀疑是液封的影响,你不妨做个试验,即不液封,因为液封只是为了使分离胶与积层胶之间的界限凭证,以保证跑出来的条带是直线的(各样同时向前)。
做人做事要低调,默默践行心中的梦想.
8楼2011-08-13 14:49:04
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