24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

shuihaizi

金虫 (小有名气)

应助: 9 (幼儿园)
金币: 45.8
帖子: 146
在线: 209.3小时
虫号: 713966

[交流] 做一个克隆所需的最短时间？比比谁更高效快速！

克隆一个基因：
第一天：小体系PCR（上午）-大体系回收（下午）-小样酶切-大体系酶切回收（包括载体）（晚上）-连接
第二天：早晨转化-晚上摇菌
第三天：PCR鉴定和提质粒酶切鉴定（上午提，下午鉴定）
一切顺利的情况下，紧忙乎，有没有更快更更高效的体系啊？
求交流！

回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

分子生化实验经验积累

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

4Kb以内的单链克隆载体已经有4人回复
求助谁见过这样的发酵摇瓶啊？已经有7人回复
导师要求测TiO2导带，现需要一篇文章，谁能帮下载下啊？已经有5人回复
懂背散射的谁知道关于氧化铝增强铝背散射的颜色已经有5人回复
新基因的克隆和荧光定量表达比较好发的SCI杂志已经有12人回复
重金求助基因克隆与功能验证方向中文摘要350字左右翻译成英语急！急！急！在线等已经有3人回复
虫子们有谁做过TA克隆呀？额想知道TA克隆的具体的实验步骤已经有25人回复
【课件】自动快速编制现金流量表已经有15人回复
【求助/交流】目的基因克隆总不成功已经有5人回复
【求助/交流】有关分子克隆发生突变的疑惑已经有9人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴

1楼 2011-08-09 22:09:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

haohaoman

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 878.7
帖子: 83
在线: 63.6小时
虫号: 410128

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
dhd997(金币+3): 牛啊 2011-08-10 12:12:17
shuihaizi(金币+3): 2011-08-10 16:35:50

看来你们很慵懒吗。
本人实验室做实验情况。
第一天：直接50ul体系PCR,5UL检测，剩下回收，NEB 5min酶切，回收，NEB T4 连接1小时，转化，涂板。基本中午能完成。TG1 8个小时就有斑长出，网上10点摇菌。
第二天：提质粒，酶切鉴定，上午肯定能搞定。

赞一下(2人)

回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

西瓜

7楼2011-08-10 11:49:04

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

haohaoman

银虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 878.7
帖子: 83
在线: 63.6小时
虫号: 410128

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖

引用回帖:

26楼: Originally posted by heroyl at 2011-08-20 13:49:58:
你这个貌似很快的样子，但是细看，首先你做PCR的时候是直接50ul体系做，简单一点、条带短的、引物特异性好的情况下这样确实没问题，但是一般的做都是先小体系验证然后再大体系回收的。再看你用的试剂，看起来都 ...

NEB的酶并没有大家想象的那么贵。常规酶的价格和takara的价格差不多。只不过NEB大包装的比较贵，如果换算成takara的小包装也是便宜的。

赞一下(1人)

回复此楼

27楼2011-08-21 11:13:48

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖