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vickie20铜虫 (小有名气)
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[求助]
提不出质粒，不知道出了什么问题，求助……
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我用的大肠杆菌BM25.8提质粒，菌已经保存一年多了，我用保存的菌液划板，然后挑取单菌落接种到液体LB里摇过夜，再用这些长好的菌液提，用的是biomiga的试剂盒，按照说明书的步骤来的，操作是没什么问题，这些质粒空载体大小有3589bp，目的基因已经测序，800-1000bp，提好后跑胶，用的5000bp的Marker，提出来的东西都比5000大，这些都不是质粒吧？做了十来天了都一直都没提好，不知道出了什么问题，原来看了好多帖子，变性时间啊，温和混匀啊，这些我都小心操作了，但是都提不出来，不知道哪里出问题了，求各位帮我分析下，哪里出差错了。 附上其中一张电泳图。 |
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