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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 双向电泳 蛋白纯化
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3205001995

新虫 (初入文坛)

[交流] 双向电泳 蛋白纯化 已有6人参与

真是郁闷，双向电泳做了很多次，但是在正极的位置聚集了很多蛋白，据说是因为含盐量太高。不知道现在有没有什么方法可以除盐（蛋白已提取）
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1楼 2011-08-03 09:09:30
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ououcao

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
2D-clean up kit对除盐还蛮好用的。就是蛋白损失比较大。
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6楼2012-02-29 11:04:02
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hqchlorella

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-08-03 20:11:29
1.首先需要参照胶条使用说明书优化你的等电聚焦程序，以达到除盐的效果；
2.你可以在电泳时剪两块大小合适的长方形滤纸（比如5mm*3mm）放在IPG胶条两端的下面，等电聚焦过程中盐分会聚集在滤纸上，如果盐很多的话，中间你也可以暂停聚焦过程换新的滤纸，这样会有很好的除盐效果。
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风一样的汉子
2楼2011-08-03 12:05:38
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maaotao

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
简单啊
1.用透析袋偷袭
2.用超滤管离心换夜
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3楼2011-08-09 14:23:44
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落满夏天

银虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
SDS电泳还好，等电聚焦必须脱盐，带电的离子会影响结果。另外考虑上量，上样大了会有影响。脱盐透析即可，但是透析后有可能造成样品不稳定，需要马上实验。这个需要摸索下。
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星星之火，可以燎原
4楼2011-08-12 11:37:00
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