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3205001995

新虫 (初入文坛)

[交流] 双向电泳 蛋白纯化 已有6人参与

真是郁闷,双向电泳做了很多次,但是在正极的位置聚集了很多蛋白,据说是因为含盐量太高。不知道现在有没有什么方法可以除盐(蛋白已提取)
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hqchlorella

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
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amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-08-03 20:11:29
1.首先需要参照胶条使用说明书优化你的等电聚焦程序,以达到除盐的效果;
2.你可以在电泳时剪两块大小合适的长方形滤纸(比如5mm*3mm)放在IPG胶条两端的下面,等电聚焦过程中盐分会聚集在滤纸上,如果盐很多的话,中间你也可以暂停聚焦过程换新的滤纸,这样会有很好的除盐效果。
风一样的汉子
2楼2011-08-03 12:05:38
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maaotao

铜虫 (初入文坛)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
简单啊
1.用透析袋偷袭
2.用超滤管离心换夜
3楼2011-08-09 14:23:44
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落满夏天

银虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
SDS电泳还好,等电聚焦必须脱盐,带电的离子会影响结果。另外考虑上量,上样大了会有影响。脱盐透析即可,但是透析后有可能造成样品不稳定,需要马上实验。这个需要摸索下。
星星之火,可以燎原
4楼2011-08-12 11:37:00
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会思想的芦苇

金虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
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silicare(金币+3): 2011-08-12 15:47:40
透析  或者  凝胶过滤
5楼2011-08-12 12:46:29
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ououcao

铁虫 (初入文坛)

★
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2D-clean up kit对除盐还蛮好用的。就是蛋白损失比较大。
6楼2012-02-29 11:04:02
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张鹏8902

银虫 (小有名气)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
蛋白除盐试剂盒,GE公司的挺好用的
你若盛开,清风自来
7楼2013-04-11 13:27:31
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