24小时热门版块排行榜    

查看: 1393  |  回复: 15
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

boymin2010

金虫 (正式写手)

[求助] PCR求助~

最近遇到疑难问题如下,请教各位大虾~不甚感谢
我的部分实验步骤如下:酶切基因组后割胶回收500~1000bp的片段,加上22bp的接头后用这个接头进行pcr验证连接效果。
问题:1、序号为107和114的泳道怎么会出现300~500bp大小的pcr产物?
      2、割胶回收的酶切产物基本集中在1000bp左右,为什么pcr产物主要集中在500bp左右?
*makerTakara的DL505(100bp ladder),最亮的条带大小是500bp.


回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

清风寨

银虫 (小有名气)

这种情况以前好像也遇到过 不知怎么搞定的 你不如试试将退火温度设成梯度试试 可能是退火温度照成的影响
冷风过心变热
16楼2011-09-23 11:20:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

taishanwei

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


boymin2010(金币+1): 2011-08-01 13:19:09
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-08-01 16:53:10
上面那张说明你没有链接成功。重新连看看。
2楼2011-08-01 13:12:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

boymin2010

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by taishanwei at 2011-08-01 13:12:40:
上面那张说明你没有链接成功。重新连看看。

如果没有连接成功就P不出东西了,因为PCR引物就是接头哦~
3楼2011-08-01 13:18:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taishanwei

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 鼓励 2011-08-01 16:53:24
你可以做个对照,拿空载体对你的引物左看看,看是不是有一样的结果。如果链接上的话,结果会非常明显,会在1000bp的位置出现条带、
4楼2011-08-01 13:24:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:27 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:15 by 9i7PCSZyMzot
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:15 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 E4V9bALS54sj 2026-09-19 3/150 2026-09-20 01:03 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:15 by 9i7PCSZyMzot
[硕博家园] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 3/150 2026-09-20 00:03 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:51 by 9i7PCSZyMzot
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:39 by 9i7PCSZyMzot
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:27 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-19 4/200 2026-09-19 23:03 by 9i7PCSZyMzot
[公派出国] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 4pRyVGCVerAA 2026-09-18 7/350 2026-09-19 21:03 by 9i7PCSZyMzot
[教师之家] 现代”学阀”该如何界定 +3 iaeyuan 2026-09-19 3/150 2026-09-19 20:52 by 没昵称呀
[基金申请] 国社科系统bug了,是不是要放榜了? +7 kynobel 2026-09-16 9/450 2026-09-19 14:52 by 接好运婷
[考博] 申博发邮件 +8 Lmengk 2026-09-15 9/450 2026-09-19 09:27 by 中间体超市
[有机交流] 各位大神,目前国内有哪些比较好用的逆合成软件? 20+3 zapen 2026-09-15 9/450 2026-09-18 18:17 by zapen
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组|2027级博士研究生招生公告 +7 水士口 2026-09-16 8/400 2026-09-16 13:47 by kkklens
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +8 两三岁ss 2026-09-14 8/400 2026-09-16 09:46 by 水士口
信息提示
请填处理意见