| 查看: 488 | 回复: 4 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
wxy1234yyf金虫 (小有名气)
|
[交流]
一个问题 已有3人参与
|
|||
| 各位师兄师姐，实验中遇到个诡异的问题想请教下：目的基因连T载体，PCR带很亮，酶切检验却看不到条带，连质粒都看不到，怎么回事呢？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有167人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
空谷幽风
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 32
- 应助: 13 (小学生)
- 贵宾: 0.05
- 金币: 1106.1
- 散金: 500
- 红花: 13
- 帖子: 615
- 在线: 116.5小时
- 虫号: 714271
- 注册: 2009-03-04
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2011-07-22 20:23:38
zlu520
至尊木虫 (职业作家)
限制人
- 应助: 8 (幼儿园)
- 金币: 20396.5
- 散金: 1372
- 红花: 8
- 帖子: 4171
- 在线: 1947.2小时
- 虫号: 877577
- 注册: 2009-10-19
- 专业: 数论
2楼2011-07-22 17:43:20
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16348.8
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3652
- 在线: 289小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+4, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-22 19:15:47
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+4, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-22 19:15:47
|
楼主说的太不明确了，PCR条带很亮是指做PCR验证的时候吗？还是你原来连接之前PCR目的基因很亮呢？ 你有没有提取重组质粒呢？ 一般验证连接的话： 1：先做一个PCR，如果可以P出来，那么很有可能就对了； 2：然后提取重组质粒，电泳验证，点样的时候可以顺便点一个空载体当对照，如果重组载体比空载体大一点的话，那就对了，当然了，这个取决于目的基因的大小了，如果是几十bp或者是100bp等小片段的话，就不太好看出来了，此时就需要进行一个酶切验证了； 3：酶切重组载体，照楼主所说，你酶切看不到条带，首先保证你重组质粒提取出来了，其次有可能是你酶切体系太小了，导致看不到；当然了胶也有可能有问题的； 祝好运！ |
3楼2011-07-22 18:48:55
wxy1234yyf
金虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 429
- 散金: 40
- 帖子: 121
- 在线: 94.9小时
- 虫号: 1335533
- 注册: 2011-07-01
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2011-07-22 19:03:33
