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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+4, EPI+1): 鼓励应助 2011-07-22 19:15:47
楼主说的太不明确了,PCR条带很亮是指做PCR验证的时候吗?还是你原来连接之前PCR目的基因很亮呢?

你有没有提取重组质粒呢?
一般验证连接的话:
1:先做一个PCR,如果可以P出来,那么很有可能就对了;
2:然后提取重组质粒,电泳验证,点样的时候可以顺便点一个空载体当对照,如果重组载体比空载体大一点的话,那就对了,当然了,这个取决于目的基因的大小了,如果是几十bp或者是100bp等小片段的话,就不太好看出来了,此时就需要进行一个酶切验证了;
3:酶切重组载体,照楼主所说,你酶切看不到条带,首先保证你重组质粒提取出来了,其次有可能是你酶切体系太小了,导致看不到;当然了胶也有可能有问题的;

祝好运!
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-07-22 18:48:55
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