应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白纯化
81/1返回列表
查看: 574  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wsz2056

金虫 (小有名气)

[交流] 蛋白纯化

我的目的蛋白很容易被洗脱下来，我觉得可能组氨酸标签与柱子结合不牢固，我想加点变性剂，如盐酸胍或者脲素，请问大家，加多少变性剂，才能保证又能使结构解开，还能保证不用蛋白复性。
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2011-07-22 08:51:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
wsz2056(金币+2):谢谢参与
西瓜(金币+5): 真正的专家！ 2011-07-22 12:04:15
引用回帖:
Originally posted by wsz2056 at 2011-07-22 08:51:46:
我的目的蛋白很容易被洗脱下来，我觉得可能组氨酸标签与柱子结合不牢固，我想加点变性剂，如盐酸胍或者脲素，请问大家，加多少变性剂，才能保证又能使结构解开，还能保证不用蛋白复性。

你这个难度太大了，既要变性又要不变性，矛盾。而且这个也没经验可用的，每个人的蛋白性质不一样，别人用0.1M可能很好，你用未必就行，个人觉得还是自己摸索是王道。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-07-22 10:17:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlu520

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-07-22 12:04:22
根据蛋白质的性质来定。。。同意楼上的实验来确定。。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-07-22 10:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsz2056

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-07-22 10:17:57:
你这个难度太大了，既要变性又要不变性，矛盾。而且这个也没经验可用的，每个人的蛋白性质不一样，别人用0.1M可能很好，你用未必就行，个人觉得还是自己摸索是王道。

谢谢   那就自己摸索 我就是怕加多了引起变性  所以向大家询问一下 有没有做过，心里有个准备
赞一下 回复此楼
4楼2011-07-22 13:36:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsz2056

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zlu520 at 2011-07-22 10:59:58:
根据蛋白质的性质来定。。。同意楼上的实验来确定。。

那你遇到过目的蛋白和镍柱结合不好的情况吗？
有什么方法？
赞一下 回复此楼
5楼2011-07-22 13:39:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-07-22 17:02:56
引用回帖:
Originally posted by wsz2056 at 2011-07-22 13:39:53:
那你遇到过目的蛋白和镍柱结合不好的情况吗？
有什么方法？

有的，重新构建，换在蛋白另外一端加了一个His-tag。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-07-22 13:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsz2056

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-07-22 13:43:11:
有的，重新构建，换在蛋白另外一端加了一个His-tag。

我这个载体只有c端有his  而且又不想换载体，因为我这个比较复杂
赞一下 回复此楼
7楼2011-07-22 14:13:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlu520

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by wsz2056 at 2011-07-22 13:39:53:
那你遇到过目的蛋白和镍柱结合不好的情况吗？
有什么方法？

可以查相关文献。。确定下变性的最佳条件。。。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-07-22 17:33:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wsz2056 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭