应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白纯化
81/1返回列表
查看: 524  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wsz2056

金虫 (小有名气)

[交流] 蛋白纯化

我的目的蛋白很容易被洗脱下来，我觉得可能组氨酸标签与柱子结合不牢固，我想加点变性剂，如盐酸胍或者脲素，请问大家，加多少变性剂，才能保证又能使结构解开，还能保证不用蛋白复性。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-07-22 08:51:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
wsz2056(金币+2):谢谢参与
西瓜(金币+5): 真正的专家！ 2011-07-22 12:04:15
引用回帖:
Originally posted by wsz2056 at 2011-07-22 08:51:46:
我的目的蛋白很容易被洗脱下来，我觉得可能组氨酸标签与柱子结合不牢固，我想加点变性剂，如盐酸胍或者脲素，请问大家，加多少变性剂，才能保证又能使结构解开，还能保证不用蛋白复性。

你这个难度太大了，既要变性又要不变性，矛盾。而且这个也没经验可用的，每个人的蛋白性质不一样，别人用0.1M可能很好，你用未必就行，个人觉得还是自己摸索是王道。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-07-22 10:17:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlu520

至尊木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-07-22 12:04:22
根据蛋白质的性质来定。。。同意楼上的实验来确定。。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-07-22 10:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsz2056

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-07-22 10:17:57:
你这个难度太大了，既要变性又要不变性，矛盾。而且这个也没经验可用的，每个人的蛋白性质不一样，别人用0.1M可能很好，你用未必就行，个人觉得还是自己摸索是王道。

谢谢   那就自己摸索 我就是怕加多了引起变性  所以向大家询问一下 有没有做过，心里有个准备
赞一下 回复此楼
4楼2011-07-22 13:36:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsz2056

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by zlu520 at 2011-07-22 10:59:58:
根据蛋白质的性质来定。。。同意楼上的实验来确定。。

那你遇到过目的蛋白和镍柱结合不好的情况吗？
有什么方法？
赞一下 回复此楼
5楼2011-07-22 13:39:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-07-22 17:02:56
引用回帖:
Originally posted by wsz2056 at 2011-07-22 13:39:53:
那你遇到过目的蛋白和镍柱结合不好的情况吗？
有什么方法？

有的，重新构建，换在蛋白另外一端加了一个His-tag。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-07-22 13:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsz2056

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-07-22 13:43:11:
有的，重新构建，换在蛋白另外一端加了一个His-tag。

我这个载体只有c端有his  而且又不想换载体，因为我这个比较复杂
赞一下 回复此楼
7楼2011-07-22 14:13:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlu520

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by wsz2056 at 2011-07-22 13:39:53:
那你遇到过目的蛋白和镍柱结合不好的情况吗？
有什么方法？

可以查相关文献。。确定下变性的最佳条件。。。
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2011-07-22 17:33:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wsz2056 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +6 majunge000 2026-08-10 6/300 2026-08-12 20:43 by JChen2024
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +9 Tide man 2026-08-11 9/450 2026-08-12 20:30 by 微不足道士
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +22 Lanmanbaby 2026-08-09 35/1750 2026-08-12 14:38 by sdfapple719
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +4 工厂打螺丝 2026-08-08 4/200 2026-08-12 09:18 by hansi2025
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 听说今天filecode变了 +26 布布和一二 2026-08-06 49/2450 2026-08-11 13:18 by WH3796
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭