24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 470  |  回复: 7

wsz2056

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!


[交流] 蛋白纯化

我的目的蛋白很容易被洗脱下来,我觉得可能组氨酸标签与柱子结合不牢固,我想加点变性剂,如盐酸胍或者脲素,请问大家,加多少变性剂,才能保证又能使结构解开,还能保证不用蛋白复性。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

兑换贵宾

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!


★ ★ ★ ★ ★ ★
wsz2056(金币+2):谢谢参与
西瓜(金币+5): 真正的专家! 2011-07-22 12:04:15
引用回帖:
Originally posted by wsz2056 at 2011-07-22 08:51:46:
我的目的蛋白很容易被洗脱下来,我觉得可能组氨酸标签与柱子结合不牢固,我想加点变性剂,如盐酸胍或者脲素,请问大家,加多少变性剂,才能保证又能使结构解开,还能保证不用蛋白复性。

你这个难度太大了,既要变性又要不变性,矛盾。而且这个也没经验可用的,每个人的蛋白性质不一样,别人用0.1M可能很好,你用未必就行,个人觉得还是自己摸索是王道。
2楼2011-07-22 10:17:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlu520

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!


★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-07-22 12:04:22
根据蛋白质的性质来定。。。同意楼上的实验来确定。。
3楼2011-07-22 10:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsz2056

超级版主

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!


引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-07-22 10:17:57:
你这个难度太大了,既要变性又要不变性,矛盾。而且这个也没经验可用的,每个人的蛋白性质不一样,别人用0.1M可能很好,你用未必就行,个人觉得还是自己摸索是王道。

谢谢   那就自己摸索 我就是怕加多了引起变性  所以向大家询问一下 有没有做过,心里有个准备
4楼2011-07-22 13:36:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsz2056

管理员

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!


引用回帖:
Originally posted by zlu520 at 2011-07-22 10:59:58:
根据蛋白质的性质来定。。。同意楼上的实验来确定。。

那你遇到过目的蛋白和镍柱结合不好的情况吗?
有什么方法?
5楼2011-07-22 13:39:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-07-22 17:02:56
引用回帖:
Originally posted by wsz2056 at 2011-07-22 13:39:53:
那你遇到过目的蛋白和镍柱结合不好的情况吗?
有什么方法?

有的,重新构建,换在蛋白另外一端加了一个His-tag。
6楼2011-07-22 13:43:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsz2056

专家顾问

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!


引用回帖:
Originally posted by lxj341401 at 2011-07-22 13:43:11:
有的,重新构建,换在蛋白另外一端加了一个His-tag。

我这个载体只有c端有his  而且又不想换载体,因为我这个比较复杂
7楼2011-07-22 14:13:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zlu520

主管区长

优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!优秀!!有木有!!!



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
Originally posted by wsz2056 at 2011-07-22 13:39:53:
那你遇到过目的蛋白和镍柱结合不好的情况吗?
有什么方法?

可以查相关文献。。确定下变性的最佳条件。。。
8楼2011-07-22 17:33:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 wsz2056 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600,321分求调剂 +12 大馋小子 2026-03-31 12/600 2026-04-01 10:52 by chemCH
[考研] 301求调剂 +8 axibli 2026-04-01 8/400 2026-04-01 09:51 by 我的船我的海
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +4 江往卖鱼 2026-03-26 4/200 2026-04-01 09:25 by oooqiao
[考研] 一志愿085600中科院宁波所276分求调剂 +20 材料学257求调剂 2026-03-28 21/1050 2026-04-01 09:20 by xiayizhi
[考研] 【调剂】一志愿厦大生物与医药调剂 +3 Echo虾米 2026-03-31 3/150 2026-04-01 08:40 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中国科学院大学265求调剂 +7 恬淡ye 2026-03-31 8/400 2026-04-01 08:38 by JourneyLucky
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +12 柳溪边 2026-03-26 13/650 2026-04-01 01:37 by 1018329917
[考研] 085602 307分 求调剂 +10 不知道叫什么! 2026-03-26 10/500 2026-03-31 19:53 by Dyhoer
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +5 Ripcord上岸 2026-03-27 5/250 2026-03-31 19:52 by mg1014
[考研] 求收留 +8 1943443204 2026-03-28 8/400 2026-03-31 15:00 by -迷了路啊路
[考博] 材料专业申博 +5 杜雨婷dyt 2026-03-29 5/250 2026-03-31 11:19 by oooqiao
[考研] 085600材料与化工调剂 +16 kikiki7 2026-03-30 16/800 2026-03-31 10:03 by 氯化亚硝酰
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +11 麻辣鱿鱼 2026-03-27 12/600 2026-03-30 19:33 by Wang200018
[考研] 332求调剂 +6 @MZB382400 2026-03-28 6/300 2026-03-30 16:57 by 无际的草原
[考研] 298求调剂 +4 种圣赐 2026-03-28 4/200 2026-03-29 08:42 by q1092522407
[考研] 312,生物学求调剂 +3 小译同学abc 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:32 by 落睿可思
[考研] 315分求调剂 +7 26考研上岸版26 2026-03-26 7/350 2026-03-28 04:05 by fmesaito
[考研] 070300化学求调剂 +4 起个名咋这么难 2026-03-27 4/200 2026-03-27 21:39 by 83503孙老师
[考研] 314求调剂 +3 溪云珂 2026-03-26 3/150 2026-03-27 11:20 by sanrepian
信息提示
请填处理意见