24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2248  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jyongchao

木虫 (正式写手)

[求助] "6% polyacrylamide sequencing gel"是指什么样的聚丙烯酰胺凝胶?

如题,"6% polyacrylamide sequencing gel"是指什么样的聚丙烯酰胺凝胶?与一般的聚丙烯酰胺凝胶凝胶有什么不同吗?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jyongchao

木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by gwbk at 2011-07-22 02:01:20:
6%聚丙烯酰胺测序胶,现在都没人配制这种胶了吧?
1,蛋白质6%变性PAGE,配制中加入pH6.8的Tris,加了10%的SDS,电泳缓冲液Tris-gly-SDS。
2,非变性PAGE(Native-PAGE),跑DNA。电泳缓冲液TAE、TBE。
3,测序 ...

谢谢指点,不过还有几个问题搞不太清楚
1、能不能把这种胶用的上样缓冲液配方说下呢?找了好几种,不知道是哪个呀。
2、配60ml的胶就要加25.2g尿素,我配的时候尿素不能完全溶解,是不是要用滤纸过滤一下?
3、这应该属于变性聚丙烯酰胺凝胶了吧,DNA加样前都要加热变性?
4、6%的测序胶跑的时候电压要多少呢?
另外谢谢斑竹提醒撒
7楼2011-07-22 18:12:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

gwbk

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
jyongchao(金币+2): 优秀 2011-07-22 09:27:36
西瓜(金币+5): Good! 2011-07-22 12:18:47
6%聚丙烯酰胺测序胶,现在都没人配制这种胶了吧?
1,蛋白质6%变性PAGE,配制中加入pH6.8的Tris,加了10%的SDS,电泳缓冲液Tris-gly-SDS。
2,非变性PAGE(Native-PAGE),跑DNA。电泳缓冲液TAE、TBE。
3,测序胶:在2的基础上加入7mol/L的尿素。
4,上样缓冲液也有所不同。
5,过硫酸铵和TEMED在DNA凝胶中浓度不随聚丙烯酰胺浓度变化而变化。
2楼2011-07-22 02:01:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaoyang636

木虫 (著名写手)

楼上正解;可以配置,也可以购买,多家公司有预制胶出售~比如invitrogen~
3楼2011-07-22 09:39:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jyongchao

木虫 (正式写手)

谢谢指点,不过还有几个问题搞不太清楚
1、能不能把这种胶用的上样缓冲液配方说下呢?找了好几种,不知道是哪个呀。
2、配60ml的胶就要加25.2g尿素,我配的时候尿素不能完全溶解,是不是要用滤纸过滤一下?
3、这应该属于变性聚丙烯酰胺凝胶了吧,DNA加样前都要加热变性?
4楼2011-07-22 09:42:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279求调剂 +8 张番茄不炒蛋 2026-04-11 8/400 2026-04-12 12:28 by wp06
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-09 12/600 2026-04-12 10:32 by 逆水乘风
[考研] 化学工程调剂289 +44 yang婷 2026-04-07 50/2500 2026-04-12 02:36 by 秋豆菜芽
[考研] 0854调剂 +8 长弓傲 2026-04-11 9/450 2026-04-11 21:44 by 蓝云思雨
[考研] 269电子信息求调剂,可转专业 +11 独酌wl 2026-04-06 11/550 2026-04-11 11:12 by 逆水乘风
[考研] 085402通信工程调剂,有4项学科竞赛国奖(电赛国二),硕士研究生调剂自荐信。 +5 m永o不v言o弃m 2026-04-09 5/250 2026-04-11 09:33 by zhq0425
[考研] 一志愿0703化学招61最终排名62化学求调剂 +24 招61排名62 2026-04-07 28/1400 2026-04-10 16:15 by yx54321
[考研] 材料复试求调剂 +20 xhhdjdjsjks 2026-04-09 20/1000 2026-04-10 10:25 by 孙小小12457
[考研] 生物学求调剂 一志愿沪9,326分 +7 刘墨墨 2026-04-06 7/350 2026-04-10 08:11 by kangsm
[考研] 材料专硕调剂 +16 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 17/850 2026-04-09 21:16 by wutongshun
[考研] 367求调剂 +10 hffQAQ 2026-04-09 10/500 2026-04-09 18:06 by lijunpoly
[论文投稿] 求助文献原文 10+3 18500821399 2026-04-08 3/150 2026-04-09 16:56 by 北京莱茵润色
[考研] 化学工程与技术专业一志愿哈工程 291分B区 国家级大创负责人 有一作论文 +13 Emmy~ 2026-04-09 13/650 2026-04-09 14:47 by only周
[考研] 368化学求调剂 +13 wwwwabcde 2026-04-07 14/700 2026-04-09 14:47 by heaven_jay
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +3 慕绝cc 2026-04-09 3/150 2026-04-09 09:57 by liuhuiying09
[考研] 一志愿985初试354分生物调剂 +3 031001 2026-04-06 3/150 2026-04-09 00:30 by Evan_Liu
[考研] 一志愿华南师范大学0702物理学305调剂 +4 念常安 2026-04-07 6/300 2026-04-08 22:53 by bljnqdcc
[考研] 323求调剂 +3 林zlu 2026-04-07 4/200 2026-04-07 23:21 by lbsjt
[考研] 316求调剂 +4 15318418673 2026-04-07 4/200 2026-04-07 22:12 by hemengdong
[考研] 软工学硕299求调剂 +6 useryy 2026-04-07 6/300 2026-04-07 09:50 by vgtyfty
信息提示
请填处理意见