24小时热门版块排行榜    

查看: 4409  |  回复: 1

yangru.520

木虫 (小有名气)

[求助] 葡萄糖标准曲线的绘制

大家好!我有一问题很纠结,关于葡萄糖标准曲线的绘制方法,该曲线用于测定udpg(尿苷二磷酸葡萄糖)酶活性。UDPG的测定方法为:参照Douglus(1988)的方法:100μL 5mmol/L UDPG加50μL 50mmol/L MgCl2、缓冲液100μL、酶提取液20μL 加100μL 20mmol/L PPi开始反应,反应15min后,沸水浴1min终止反应。冷却后加100μL 6mmol/L NADP(辅酶Ⅱ)、100μL(50μL) 1.5 IU/ml磷酸葡萄糖变位酶,50μL 5(1.5)IU/ml的6-磷酸葡萄糖脱氢酶,0.3(0.9)ml缓冲液,总体积1.5ml,30℃反应5~10min后,340nm比色,用G-1-P(1-磷酸葡萄糖)做标准曲线。做葡萄糖标准曲线时,设置不同葡萄糖浓度梯度后,不同浓度的葡萄糖溶液是在100μL 6mmol/L NADP(辅酶Ⅱ)、100μL(50μL) 1.5 IU/ml磷酸葡萄糖变位酶,50μL 5(1.5)IU/ml的6-磷酸葡萄糖脱氢酶,0.3(0.9)ml缓冲液,总体积1.5ml,30℃反应5~10min后,340nm比色条件下做OD值呢?还是直接就在DNS配方条件下于540nm条件下测OD值?前一种是否有依据,我也不太清楚,望各位虾友指点指点!不胜感激!

[ Last edited by yangru.520 on 2011-7-20 at 23:12 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

斌斌1990

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励交流 2011-07-21 09:51:43
yangru.520(金币+1): 2011-07-22 16:22:47
应该是后者,直接在DNS配方条件下,沸水浴后于540nm条件下测OD值,因为标准曲线是葡萄糖浓度与Abs540的直接对应关系,不能加入的其他的。
科研路漫漫修远,吾将实验而求索
2楼2011-07-20 23:35:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yangru.520 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-16 06:24 by LH5NkK5Ud4bh
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 23jxep3nCNZb 2026-09-14 3/150 2026-09-16 05:51 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 5/250 2026-09-16 05:11 by LH5NkK5Ud4bh
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-16 03:38 by DgNGHc3h5tPl
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-16 03:14 by DgNGHc3h5tPl
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-16 03:02 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-16 02:14 by DgNGHc3h5tPl
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 23jxep3nCNZb 2026-09-14 4/200 2026-09-15 18:11 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 17:15 by CgyNCDVNhGVg
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 7/350 2026-09-15 16:47 by CgyNCDVNhGVg
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 7/350 2026-09-15 14:49 by VMDqgnlKimtZ
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +7 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 9/450 2026-09-15 14:10 by VMDqgnlKimtZ
[考博] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:58 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 6F5UbRU2I5hL 2026-09-14 4/200 2026-09-15 07:50 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-15 07:46 by C79jjtjAKjEn
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-15 07:02 by 5BDX0d0WFp7t
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +6 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 6/300 2026-09-15 05:50 by 5BDX0d0WFp7t
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:25 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
信息提示
请填处理意见