应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 为什么液相色谱基线严重漂移？
51/1返回列表
查看: 3756  |  回复: 18
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

zxtcm

金虫 (初入文坛)

[交流] 为什么液相色谱基线严重漂移？已有12人参与

情况是这样的：是摸好的条件，对照品和以前的样品没有发生这种情况。

样品使用50%乙醇溶解，流动相为水-乙腈-0.1%甲酸（两相均加），梯度洗脱，从13%的乙腈到60%的乙腈，基线出现上移时即为梯度变化的地方。波长270nm。angilent1260，自动进样，柱温30度。c-18柱15cm。

①怀疑是有色素干扰，但是之前的样品完全没有漂移。

②怀疑检测器灯能量不足，更换后没有变化。

③怀疑预柱问题，拆除预柱没有变化。

④不可能使流动相梯度问题，对照品没有问题。但如果跑完样品在跑对照品会漂。

⑤怀疑色谱柱，更换安捷伦柱第一针没有漂，第二针又出现漂移。

⑥样品澄清，应该没有叶绿素。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2011-07-19 18:00:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxtcm

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 57revival at 2011-07-19 20:55:56:
你做对照的时候都没问题，但做完样品再做对照基线就飘了。所以我觉得应该是样品的问题，楼上说的PH可以考虑哈，但是你说条件都是摸好了都嘛，PH应该考虑在内了。我看你的图谱，响应值怎么这么低，根本没出峰嘛，都 ...

非常感谢57revival 兄的分析，几条原因都是HPLC中常遇到的问题，没有大量的一线实验工作不可能清晰的知道这些的。

贴的图谱是没有成分峰出现，但其它图谱基线都是这样的。

1、“柱压不稳。”可以排除，安捷伦柱压记录显示柱压平稳。

2、“柱子不干净了，有杂质。”可以排除，每次用前和用后均用甲醇洗柱，第一针对照品不会漂。但是如果样品杂质发生变化，是不是会有不在c18柱上成峰的成分干扰？比如非极性的色素？

3、“柱效降低，基本没柱效。”柱效降低是有可能的，流动相里有0.1%甲酸，长期使用柱效肯定下降。但是对比现在与之前出峰时间基本一样，不至于没有柱效。
用完先90%的水冲再甲醇冲，后来就只用甲醇冲不知合不合适。用前甲醇30min，然后流动相平衡至基线稳定。

4、“柱温箱温度异常。”可以排除，柱温显示误差小于0.1°C。

5、“泵液不均，可手动测一下泵的精确度。”这个没有测过，曾经有同学发现AB通道出现出峰时间变化过大的现象，换CD通道就好了。如果出峰时间变化不大，泵液应该是准的。
赞一下 回复此楼
5楼2011-07-20 15:21:54
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

干一行爱一行

铜虫 (初入文坛)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
pplover(金币+2): 合理的建议1。鼓励新虫交流1。。 2011-07-23 20:02:58
有没有可能是这批的PH有问题啊？你做了那么多的排除工作，换一台仪器做，如果还是这样，就只有是样品问题了。
赞一下(2人) 回复此楼
超越一切想超越的人！
2楼2011-07-19 18:39:14
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

57revival

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
pplover(金币+3): 感谢交流。。。 2011-07-23 20:02:29
你做对照的时候都没问题，但做完样品再做对照基线就飘了。所以我觉得应该是样品的问题，楼上说的PH可以考虑哈，但是你说条件都是摸好了都嘛，PH应该考虑在内了。我看你的图谱，响应值怎么这么低，根本没出峰嘛，都40多min了。一般基线飘可能会是：1、柱压不稳。2、柱子不干净了，有杂质。3、柱效降低，基本没柱效。4、柱温箱温度异常。5、泵液不均，可手动测一下泵的精确度。
赞一下(2人) 回复此楼
海纳百川，有容乃大；壁立千仞，无欲则刚。
3楼2011-07-19 20:55:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zxtcm

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by 干一行爱一行 at 2011-07-19 18:39:14:
有没有可能是这批的PH有问题啊？你做了那么多的排除工作，换一台仪器做，如果还是这样，就只有是样品问题了。

你是说样品的pH值吗？可能性不大，因为就算是pH值变化了，可能出峰时间面积之类会变化，但基线无论如何不会漂成这样。

我一直怀疑有脂溶性色素干扰，在有机相浓度加大时，被洗脱，出现“吸收包”，随后有回落，下一个梯度出现，有机相浓度再次加大，再出现下一个吸收包，随后回落。但是问题是之前的样品没有这种情况，而且是连续进样，两针见有5min初始浓度流动相的平衡。真是见鬼了。

[ Last edited by zxtcm on 2011-7-20 at 14:37 ]
赞一下 回复此楼
4楼2011-07-19 20:59:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭