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libing198968

银虫 (初入文坛)

[求助] RACE实验中的 GC-Rich 问题

大家好,我刚开始做RACE的新兵,我用的是Clontech的SMARTer™ RACE  cDNA Amplification Kit。说明书上提示说GC含量过高,不能得到预期产物,就要用Clontech 提供Advantage GC 2 Polymerase Mix (Cat. No. 639114) and PCR Kit (Cat. Nos. 639119 &639120) 来有效扩增 GC-rich模板。
我想问一下,对于植物而言,GC含量多少以上就算是GC含量过高呢?
还有就是假设预期的GC含量比较高,但真实的GC含量没有那么高,用Advantage GC 2 Polymerase Mix 来扩增会不会更加影响扩增效率呢?
求大侠指点
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guanzhow

木虫 (小有名气)

哪位大侠知道
SMARTer II A Oligonucleotide (12 μM)
5'–AAGCAGTGGTATCAACGCAGAGTACXXXXX–3'
(X = undisclosed base in the proprietary SMARTer oligo sequence)
X是哪些碱基, 可以用什么替代 ?
谢谢!
7楼2011-09-27 12:33:23
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