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chui2004

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 携带kan抗性的质粒载体菌株在含Amp抗性的平板上生长,这是怎么回事?

我将以前保存的Kan抗性的菌株进行活化,发现在Kan抗性的平板上生长,同时也在Amp抗性的平板上生长,请教各位,这是怎么回事呢?
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相信自己,一定能成功!
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ck8148

金虫 (初入文坛)

建议楼主从以下几点分析:
1.Amp的浓度不合适,没有达到抑菌作用
2.Amp失效(这与保质期无关,长期室温放置等都可能是其效率下降)
3.工程菌反复冻融,或有杂菌污染,建议从新划线培养纯化。
4.质粒上原本就含有Amp抗性基因。
前两点的可能性较大,如果有菌的形态及色泽不一样,则第三点的可能性较大。
8楼2011-07-22 09:45:25
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hgq115

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 鼓励交流 2011-07-15 12:32:36
chui2004(金币+1): 2011-07-20 16:36:26
1、菌株含有杂菌
2、Amp 失效
3、Amp板忘加Amp
4、菌株具有双抗性
2楼2011-07-15 10:12:16
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chui2004

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by hgq115 at 2011-07-15 10:12:16:
1、菌株含有杂菌
2、Amp 失效
3、Amp板忘加Amp
4、菌株具有双抗性

菌株是工程菌株,应该是没有杂菌;Amp失效日期要到2015年,板子上加了AMP的,菌株只具有kan抗性。
我觉得是不是涂布在平板上的菌液浓度太高了以至于在Amp平板上长出菌落。
相信自己,一定能成功!
3楼2011-07-15 15:41:26
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zhshch2009

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


amisking(金币+1): 鼓励应助 2011-07-15 20:40:43
是不是平皿搞错了,做个对照就知道了,找两个各带卡纳和氨苄抗性的空载体,一涂见分晓
4楼2011-07-15 16:31:22
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