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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 测葡萄糖含量的一般用什么方法？
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一流涧水

金虫 (正式写手)

[求助] 测葡萄糖含量的一般用什么方法？

Sample Text
麻烦各位，我要测发酵液中残留的葡萄糖含量，但我的微生物本身发酵会产生多糖，有没有一种方法只能测葡萄糖，而不会测多糖的？谢谢了！
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1楼 2011-07-06 22:01:22
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chengjg

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

DNS就行 它对多糖不显色 一般微生物也不会产还原糖。用液相色谱没必要。
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3楼2011-07-06 23:48:34
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查看全部 9 个回答

冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3, EPI+1): 辛苦 2011-07-06 22:32:24
一流涧水(金币+5): 2011-07-11 11:22:46
DNS法是测定还原糖的，不单只葡萄糖，其它还原糖也可以测，原理是在碱性下将DNS还原生成呈色物质。所以如果能确定发酵液里没有其它还原糖才能用，但是即使是自己认为没有，评委也会怀疑的，所以慎用。

GOD法比较专一，葡萄糖在葡萄糖氧化酶(GOD)作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢(H2O2)；然后用过氧化物酶(POD)催化过氧化氢，使色原物质(4-氨基安替比林)生成醌亚胺，颜色的深浅与葡萄糖浓度成正比。我试过，与蔗糖、麦芽糖、果糖、淀粉都不显色，只与葡萄糖显色。我用这个方法来测定含有糖化酶的发酵液降解淀粉产生葡萄糖，因为发酵液里的酶成分不能确定，所以要选用GOD法，不能选用DNS法。

HPLC也可以。将葡萄糖配制成特定浓度的标准溶液，跑一个峰，记录保留时间。然后发酵液跑一次，在相同的保留时间处就是葡萄糖，峰面积与标准溶液相比较就知道浓度了。不过发酵液要处理干净，不能有不溶的杂质，先离心，再用0.22微米的滤膜过滤，不然一根糖柱一万五用一次就废了。
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一流涧水
流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-07-06 22:29:14
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墨香若水

木虫 (著名写手)

小小囧虫

【答案】应助回帖

个人觉得DNS不靠谱，HPLC吧~
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仕不可不弘毅，任重而道远
5楼2011-07-07 09:36:58
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一流涧水

金虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-07-06 22:29:14:
DNS法是测定还原糖的，不单只葡萄糖，其它还原糖也可以测，原理是在碱性下将DNS还原生成呈色物质。所以如果能确定发酵液里没有其它还原糖才能用，但是即使是自己认为没有，评委也会怀疑的，所以慎用。

GOD法比 ...

GOD法是用葡萄糖氧化酶试剂盒吗？还是自己配制的？
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6楼2011-07-07 09:47:28
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