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一流涧水

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[求助] 测葡萄糖含量的一般用什么方法？

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麻烦各位，我要测发酵液中残留的葡萄糖含量，但我的微生物本身发酵会产生多糖，有没有一种方法只能测葡萄糖，而不会测多糖的？谢谢了！

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1楼 2011-07-06 22:01:22

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冼亮淀粉酶

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3, EPI+1): 辛苦 2011-07-06 22:32:24
一流涧水(金币+5): 2011-07-11 11:22:46

DNS法是测定还原糖的，不单只葡萄糖，其它还原糖也可以测，原理是在碱性下将DNS还原生成呈色物质。所以如果能确定发酵液里没有其它还原糖才能用，但是即使是自己认为没有，评委也会怀疑的，所以慎用。

GOD法比较专一，葡萄糖在葡萄糖氧化酶(GOD)作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢(H2O2)；然后用过氧化物酶(POD)催化过氧化氢，使色原物质(4-氨基安替比林)生成醌亚胺，颜色的深浅与葡萄糖浓度成正比。我试过，与蔗糖、麦芽糖、果糖、淀粉都不显色，只与葡萄糖显色。我用这个方法来测定含有糖化酶的发酵液降解淀粉产生葡萄糖，因为发酵液里的酶成分不能确定，所以要选用GOD法，不能选用DNS法。

HPLC也可以。将葡萄糖配制成特定浓度的标准溶液，跑一个峰，记录保留时间。然后发酵液跑一次，在相同的保留时间处就是葡萄糖，峰面积与标准溶液相比较就知道浓度了。不过发酵液要处理干净，不能有不溶的杂质，先离心，再用0.22微米的滤膜过滤，不然一根糖柱一万五用一次就废了。