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xiaohong88银虫 (小有名气)
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菌体生长量
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各位好： 我对一株放线菌进行种子培养基的优化，看到有的文献说指标为菌丝生长量。我想问一下这个菌丝生长量是指稳定期的菌丝量吗？是不是稳定期的菌丝量比较大，在一定的程度上也表明对数期的生长速率比较快？ |
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iaminxanadu
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2楼2011-07-07 09:58:35
iaminxanadu
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3楼2011-07-07 10:01:49
iaminxanadu
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4楼2011-07-07 10:08:31
xiaohong88
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5楼2011-07-08 15:30:24
iaminxanadu
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6楼2011-07-08 15:33:24
xiaohong88
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您好，我又重新看了您的帖子，并再思考了一下 1、您之前提到的说把种子液进行培养，每隔N个小时后拿去进行发酵，这就相当于是在做种龄的实验了吧。 2、而我现在要做的是种子液培养基的优化实验，那就相当于只是改变培养基的成分，而所有其它的因素都先把它固定下来，包括种龄也要固定下来。 3、我现在还有几个问题感到有点困惑，想要请教一下，我一开始把无菌水倒入斜面，制备孢子悬浮液，这个无菌水的量应该是多少，怎么来确定呢?完了之后，我再按照一定的比例接入有不同比例的种子培养基中。到了这一步后，我看了许多的文献，文献上都有确定的时间，比例说培养了20小时，或是12小时的，完了之后再进行发酵。我想问这个时间他们是怎么确定的？是之前已经做了生长曲线，知道在相同的条件下这个时间段是对数期吗？ 谢谢！ |
7楼2011-07-12 21:39:35
iaminxanadu
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【答案】应助回帖
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rainwander(金币+5, EPI+1): 2011-07-13 16:01:36
rainwander(金币+5, EPI+1): 2011-07-13 16:01:36
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首先回答一下孢子悬液的问题。 工业上一般制作孢子都是用装液量是100ml茄形瓶来做，最后等孢子成熟后加50ml甘油水或DMSO（20%），刮下玻璃珠振荡，分装1~1.5ml。保存。 实验室里9厘米的平板，20ml...... 这也只是一个习惯做法，不是每种防线菌都一定要这样。但要保证孢子浓度，一般不低于10^9ml^-1 再来说一下原来的问题。 种子的培养基优化也好、种龄也好，本质上是相联系的。不能单纯的拿一个指标进行优化，即便你看到某些文献这样做了，那是为了研究影响因素。 你固定了种龄去优化培养基时，会得到较优的结果，但这里面可能存在遗漏。 比如说，你固定在35小时。开始实验：第一组配方A1+B2+C3+D4，第二组A2+B3+C4+D1.......，你得出了第一组结果最好。但很可能你要是延长或缩短了种龄，第二组的结果会更好。 所以，要看发酵结果来反推哪个培养基，哪个时间的培养基最佳。 不知道，我说的清楚不？  |
8楼2011-07-13 09:11:31
iaminxanadu
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【答案】应助回帖
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rainwander(金币+3, EPI+1): 2011-07-13 16:01:51
rainwander(金币+3, EPI+1): 2011-07-13 16:01:51
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还有个问题刚看到。关于种龄的确定。 文献上的时间，当然是通过大量实验摸索的啊。 并且不是通过生长曲线来确定的。生长曲线很明确的分了几个阶段，对数生长期来说，也不是一个点，是一段时间，那么怎么种龄的时间一般都说成一个点：比如培养24小时，或培养36小时，但很少说培养20~24小时。即便有，那也是通过实验知道了这段时间都行（影响不大），或者是一种估测，或者是为了保密。 前阶段我发了个相关的帖子，忘了在哪了。总之，生长曲线的不是那么重要，重要的是看种子的状态，生理状态的“好坏”，要看对发酵结果的影响。 一个种子培养基里都是葡萄糖，长的没的说，本来28小时成熟，现在呢14小时OK了，敢用吗？ 刚开始的回帖中，我说的就是这个意思。14小时的种子也长够了，但生理状态呢？微观上的基因表达呢？是不是培养过程中淀粉利用相关的酶类转录表达过程变化了？会不会影响下游发酵？会不会富集了那些懒汉？到发酵培养里谁干活？怎么产出？ 首先得知道种子培养的目的是什么？ 种子培养就是为发酵做准备。这种准备既是量上的准备，也是质上的准备。配方也是作为一种过渡。即在一定时间内获得一定生理状态的菌体。 为什么看起来这么纠结呢？因为，我们还没有透彻的了解这个过程，这个过程的关键点是什么不知道，所以不能只看种龄。 |
9楼2011-07-13 09:34:05
xiaohong88
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10楼2011-07-13 11:04:42
