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iaminxanadu

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
rainwander(金币+5, EPI+1): 2011-07-13 16:01:36

首先回答一下孢子悬液的问题。

工业上一般制作孢子都是用装液量是100ml茄形瓶来做，最后等孢子成熟后加50ml甘油水或DMSO（20%），刮下玻璃珠振荡，分装1~1.5ml。保存。

实验室里9厘米的平板，20ml......

这也只是一个习惯做法，不是每种防线菌都一定要这样。但要保证孢子浓度，一般不低于10^9ml^-1

再来说一下原来的问题。

种子的培养基优化也好、种龄也好，本质上是相联系的。不能单纯的拿一个指标进行优化，即便你看到某些文献这样做了，那是为了研究影响因素。

你固定了种龄去优化培养基时，会得到较优的结果，但这里面可能存在遗漏。

比如说，你固定在35小时。开始实验：第一组配方A1+B2+C3+D4，第二组A2+B3+C4+D1.......，你得出了第一组结果最好。但很可能你要是延长或缩短了种龄，第二组的结果会更好。

所以，要看发酵结果来反推哪个培养基，哪个时间的培养基最佳。

不知道，我说的清楚不？

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8楼2011-07-13 09:11:31

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iaminxanadu

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
rainwander(金币+3, EPI+1): 2011-07-13 16:01:51

还有个问题刚看到。关于种龄的确定。

文献上的时间，当然是通过大量实验摸索的啊。

并且不是通过生长曲线来确定的。生长曲线很明确的分了几个阶段，对数生长期来说，也不是一个点，是一段时间，那么怎么种龄的时间一般都说成一个点：比如培养24小时，或培养36小时，但很少说培养20~24小时。即便有，那也是通过实验知道了这段时间都行（影响不大），或者是一种估测，或者是为了保密。

前阶段我发了个相关的帖子，忘了在哪了。总之，生长曲线的不是那么重要，重要的是看种子的状态，生理状态的“好坏”，要看对发酵结果的影响。

一个种子培养基里都是葡萄糖，长的没的说，本来28小时成熟，现在呢14小时OK了，敢用吗？
刚开始的回帖中，我说的就是这个意思。14小时的种子也长够了，但生理状态呢？微观上的基因表达呢？是不是培养过程中淀粉利用相关的酶类转录表达过程变化了？会不会影响下游发酵？会不会富集了那些懒汉？到发酵培养里谁干活？怎么产出？

首先得知道种子培养的目的是什么？

种子培养就是为发酵做准备。这种准备既是量上的准备，也是质上的准备。配方也是作为一种过渡。即在一定时间内获得一定生理状态的菌体。

为什么看起来这么纠结呢？因为，我们还没有透彻的了解这个过程，这个过程的关键点是什么不知道，所以不能只看种龄。

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9楼2011-07-13 09:34:05

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