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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC梯度洗脱，总出现很强的一个峰怎么回事？
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yukepotato

金虫 (正式写手)

美猴王
我看了下你的图和描述。那压力变化和基线波动都是正常的，因为你是梯度不是走的等度。
此外在14min的峰很可能是系统或是流动相引起的，你可以逐一排除！
等待楼主的反馈！
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jinglh8288
永远不要带着问题去找你的上司！
31楼2011-07-07 18:50:47
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jinglh8288

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by yukepotato at 2011-07-07 18:50:47:
我看了下你的图和描述。那压力变化和基线波动都是正常的，因为你是梯度不是走的等度。
此外在14min的峰很可能是系统或是流动相引起的，你可以逐一排除！
等待楼主的反馈！

请问如何排查呢？我走了空针和甲醇结果和走样品一样……另外昨天又连接了两通，走了相同的方法，结果仍然有波动，只不过不像接柱子时那样是很大的峰，这说明什么呢？谢谢！
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一分耕耘，一分收获。
32楼2011-07-08 08:19:57
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yukepotato

金虫 (正式写手)

美猴王
引用回帖:
Originally posted by jinglh8288 at 2011-07-08 08:19:57:
请问如何排查呢？我走了空针和甲醇结果和走样品一样……另外昨天又连接了两通，走了相同的方法，结果仍然有波动，只不过不像接柱子时那样是很大的峰，这说明什么呢？谢谢！

有没有换换流动相试试啊？
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永远不要带着问题去找你的上司！
33楼2011-07-08 11:49:19
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jinglh8288

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by yukepotato at 2011-07-08 11:49:19:
有没有换换流动相试试啊？

这个到没有，可以试试！谢谢你的建议！
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一分耕耘，一分收获。
34楼2011-07-08 12:10:34
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jinglh8288

木虫 (正式写手)
给位虫友，今天我改变了流速和梯度变化速率发现响应值降低到了原来的六分之一……请问这又该如何解释呢？好困惑啊！
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一分耕耘，一分收获。
35楼2011-07-08 17:23:08
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jinglh8288

木虫 (正式写手)
各位虫友，今天降低了流速和梯度变化速率，结果发现那个大峰的响应值降低到了原来的六分之一，而且这个大峰并不是规则的对称尖锐的峰，而且似乎还包含一些小峰（与之前的峰形状相同，只是强度相差很大），请问这又该如何解释呢？好困惑啊！
      如果这个大峰是杂质，那么为什么用%B的流动相却没有这样的大峰呢，而是一条直线，难道有东西只有在梯度洗脱的时候才能被洗脱掉，而在100%B却不能洗脱下来？会有这样的情况么？恳请各位虫友帮忙分析一下，先谢谢了！
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一分耕耘，一分收获。
36楼2011-07-08 17:30:05
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海精灵

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by ztagri at 2011-07-05 12:07:49:
水，如果是娃哈哈，基本会有峰。仪器不同，峰高不一样，后来买了超纯水基本上基线没出过问题。

请问你用的是什么流动相？一直有个问题在困扰着我，我的流动相是缓冲盐，反相c18,即使用流动相作为样品，在1.5到2.5分钟之间也会有很大的峰出现。
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37楼2011-07-11 12:46:15
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shine911

木虫 (小有名气)
你梯度100%有机相保持一段时间后在回到起始梯度50%有机相，并保持一段时间，让柱子充分平衡试试。
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38楼2011-12-15 19:54:35
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zhangsh168

木虫 (正式写手)
色谱柱是不是新的 或用过的
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39楼2011-12-15 20:33:18
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wonder2002

金虫 (正式写手)
如果检测器不好，很容易受溶剂波动（压力）的影响，出现这种怪怪的系统峰。
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等~
40楼2012-06-29 00:29:46
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