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jinglh8288

木虫 (正式写手)

[求助] HPLC梯度洗脱,总出现很强的一个峰怎么回事?

实验室新买了一台快速色谱,用的是2.1*50的XDB-C18的色谱柱,0.25mL/min的流速,自动进样器进样,乙腈水为流动相,梯度条件是50%B运行4min,线性梯度,10min时乙腈增加到100%,并维持10min,结果不论是运行样品还是只走流动相,还是进甲醇,在大概14min都会出现一个很强的峰,而且基线漂移,同时监测压力可以看到在大约13min到14min之间压力会从大约135bar降到90bar左右,随后采集的信号和压力基本都为直线……请问这到底是怎么回事呢?进样前,色谱柱已经充分平衡好了!很急,谢谢大家的帮助!
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一分耕耘,一分收获。
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jinglh8288

木虫 (正式写手)

各位虫友,今天降低了流速和梯度变化速率,结果发现那个大峰的响应值降低到了原来的六分之一,而且这个大峰并不是规则的对称尖锐的峰,而且似乎还包含一些小峰(与之前的峰形状相同,只是强度相差很大),请问这又该如何解释呢?好困惑啊!
      如果这个大峰是杂质,那么为什么用%B的流动相却没有这样的大峰呢,而是一条直线,难道有东西只有在梯度洗脱的时候才能被洗脱掉,而在100%B却不能洗脱下来?会有这样的情况么?恳请各位虫友帮忙分析一下,先谢谢了!
一分耕耘,一分收获。
36楼2011-07-08 17:30:05
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jinglh8288

木虫 (正式写手)

急切得到大家的帮助,谢谢!在线等……
一分耕耘,一分收获。
2楼2011-07-05 11:55:22
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匿名

用户注销 (正式写手)


opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-07-05 22:02:17
本帖仅楼主可见
3楼2011-07-05 12:02:20
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ztagri

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

jinglh8288(金币+2): 哇哈哈水回有影响?峰远远大于我的样品峰啊!谢谢 2011-07-05 12:18:13
水,如果是娃哈哈,基本会有峰。仪器不同,峰高不一样,后来买了超纯水基本上基线没出过问题。
4楼2011-07-05 12:07:49
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