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jinglh8288

木虫 (正式写手)

[求助] HPLC梯度洗脱,总出现很强的一个峰怎么回事?

实验室新买了一台快速色谱,用的是2.1*50的XDB-C18的色谱柱,0.25mL/min的流速,自动进样器进样,乙腈水为流动相,梯度条件是50%B运行4min,线性梯度,10min时乙腈增加到100%,并维持10min,结果不论是运行样品还是只走流动相,还是进甲醇,在大概14min都会出现一个很强的峰,而且基线漂移,同时监测压力可以看到在大约13min到14min之间压力会从大约135bar降到90bar左右,随后采集的信号和压力基本都为直线……请问这到底是怎么回事呢?进样前,色谱柱已经充分平衡好了!很急,谢谢大家的帮助!
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一分耕耘,一分收获。
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jinglh8288

木虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
Originally posted by yukepotato at 2011-07-07 18:50:47:
我看了下你的图和描述。那压力变化和基线波动都是正常的,因为你是梯度不是走的等度。
此外在14min的峰很可能是系统或是流动相引起的,你可以逐一排除!
等待楼主的反馈!

请问如何排查呢?我走了空针和甲醇结果和走样品一样……另外昨天又连接了两通,走了相同的方法,结果仍然有波动,只不过不像接柱子时那样是很大的峰,这说明什么呢?谢谢!
一分耕耘,一分收获。
32楼2011-07-08 08:19:57
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jinglh8288

木虫 (正式写手)

急切得到大家的帮助,谢谢!在线等……
一分耕耘,一分收获。
2楼2011-07-05 11:55:22
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匿名

用户注销 (正式写手)


opq691(金币+1): O(∩_∩)O谢谢 2011-07-05 22:02:17
本帖仅楼主可见
3楼2011-07-05 12:02:20
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ztagri

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

jinglh8288(金币+2): 哇哈哈水回有影响?峰远远大于我的样品峰啊!谢谢 2011-07-05 12:18:13
水,如果是娃哈哈,基本会有峰。仪器不同,峰高不一样,后来买了超纯水基本上基线没出过问题。
4楼2011-07-05 12:07:49
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