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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 微米和纳米 » 学术讨论 » 量子点与抗体的偶联
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lixuepu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 伊娃EVA at 2011-07-06 09:48:23:
我也想问怎么连~~~~~

我也连不上  连上透析后没有荧光

是额是额，我也练了好久，真是郁闷啊……
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奋斗就有希望。
11楼2011-07-06 12:18:15
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lixuepu

金虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by ashui001 at 2011-07-06 11:51:05:
你EDC加的量太多了，量子点：EDC一般1：100就可以了，还有你加的IgG也少了点，量子点：IgG要1：:10以上吧，这样才链接的多点

要加10倍的IgG的话，很难分开没连量子点和连了量子点的抗体额，那我加10倍的QDS可以不，毕竟QDS尺寸比蛋白小的多，很容易就阔仪分开了的额……
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奋斗就有希望。
12楼2011-08-10 11:32:39
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ashui001

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

lixuepu(金币+3): 2011-08-30 10:36:01
引用回帖:
12楼: Originally posted by lixuepu at 2011-08-10 11:32:39:
要加10倍的IgG的话，很难分开没连量子点和连了量子点的抗体额，那我加10倍的QDS可以不，毕竟QDS尺寸比蛋白小的多，很容易就阔仪分开了的额……

这个不太清楚哦，理论上应该可以的，但你做免疫试验的时候就需要多加点偶联的复合物了，因为你的里面很多量子点是没免疫活性的

或者你需要想办法把没连抗体的量子点和连上了的分开
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kundaobio.com,昆道生物，量子点合成、修饰及其生物医学应用，量子点荧光抗体定制和服务
13楼2011-08-10 16:14:01
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zkwysw

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

lixuepu(金币+4): 2011-08-30 10:36:15
将2nmol 量子点加入50 uL 浓度为50 mM的EDC水溶液,
加入适量的抗体分子 (通常与量子点的数量比为5:1至10:1)
室温下温和振荡2小时,结束反应.
纯化
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14楼2011-08-12 11:07:34
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ashui001

木虫 (著名写手)
帖子真精彩!
已经收录到淘贴专辑《量子点》
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kundaobio.com,昆道生物，量子点合成、修饰及其生物医学应用，量子点荧光抗体定制和服务
15楼2011-08-30 17:05:11
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飞飞鱼yjf

新虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by lixuepu at 2011-07-03 16:12:07:
最近在做一个量子点与羊抗猪的IgG的偶联，也就是我的二抗，分子量大概150KD，我加的NHS和EDC的比例一般是1.2：1，量子点是巯基丙酸修饰的，量子点和EDC比例大概1：1000，一般先加EDC,NHS活化量子点半小时，再加1. ...

我最近也在做量子点与BSA相连，我用巯基乙酸修饰的量子点与BSA相连后用电泳分析，还用加了单独的量子点做对照，结果跑了后每个孔都没有条带，孔里也没荧光了。想请问下1楼的是怎么跑的电泳？谢谢。
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16楼2011-10-04 15:52:57
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galaxynano

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
17楼2011-10-07 11:44:21
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胡杨立江

铁虫 (初入文坛)
我也在做类似的连接，只不过我的是PEG末端的羧基和肽段接，肽段分子量也就500多一点，我的问题是PEG的量和EDC、NHS的量比值控制在多少比较合适呢，肽段的量要多加一点吗？谢谢
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我就是飘泊天涯的一只狼
18楼2012-08-24 15:10:51
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胡杨立江

铁虫 (初入文坛)
我也在做类似的连接，只不过我的是PEG末端的羧基和肽段接，肽段分子量也就500多一点，我的问题是PEG的量和EDC、NHS的量比值控制在多少比较合适呢，肽段的量要多加一点吗？谢谢
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我就是飘泊天涯的一只狼
19楼2012-08-24 15:11:42
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jinming2004416

铜虫 (小有名气)
买进口的edc
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坚持就是胜利
20楼2012-09-05 11:10:13
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