【答案】应助回帖

奋斗就有希望。

11楼2011-07-06 12:18:15

lixuepu

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10楼: Originally posted by ashui001 at 2011-07-06 11:51:05:
你EDC加的量太多了，量子点：EDC一般1：100就可以了，还有你加的IgG也少了点，量子点：IgG要1：:10以上吧，这样才链接的多点

要加10倍的IgG的话，很难分开没连量子点和连了量子点的抗体额，那我加10倍的QDS可以不，毕竟QDS尺寸比蛋白小的多，很容易就阔仪分开了的额……

奋斗就有希望。

12楼2011-08-10 11:32:39

ashui001

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【答案】应助回帖

lixuepu(金币+3): 2011-08-30 10:36:01

引用回帖:

12楼: Originally posted by lixuepu at 2011-08-10 11:32:39:
要加10倍的IgG的话，很难分开没连量子点和连了量子点的抗体额，那我加10倍的QDS可以不，毕竟QDS尺寸比蛋白小的多，很容易就阔仪分开了的额……

这个不太清楚哦，理论上应该可以的，但你做免疫试验的时候就需要多加点偶联的复合物了，因为你的里面很多量子点是没免疫活性的

或者你需要想办法把没连抗体的量子点和连上了的分开

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13楼2011-08-10 16:14:01

zkwysw

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【答案】应助回帖

lixuepu(金币+4): 2011-08-30 10:36:15

将2nmol 量子点加入50 uL 浓度为50 mM的EDC水溶液,
加入适量的抗体分子 (通常与量子点的数量比为5:1至10:1)
室温下温和振荡2小时,结束反应.
纯化

14楼2011-08-12 11:07:34

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15楼2011-08-30 17:05:11

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引用回帖:

1楼: Originally posted by lixuepu at 2011-07-03 16:12:07:
最近在做一个量子点与羊抗猪的IgG的偶联，也就是我的二抗，分子量大概150KD，我加的NHS和EDC的比例一般是1.2：1，量子点是巯基丙酸修饰的，量子点和EDC比例大概1：1000，一般先加EDC,NHS活化量子点半小时，再加1. ...

我最近也在做量子点与BSA相连，我用巯基乙酸修饰的量子点与BSA相连后用电泳分析，还用加了单独的量子点做对照，结果跑了后每个孔都没有条带，孔里也没荧光了。想请问下1楼的是怎么跑的电泳？谢谢。

16楼2011-10-04 15:52:57