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lixuepu

金虫 (正式写手)

[求助] 量子点与抗体的偶联

最近在做一个量子点与羊抗猪的IgG的偶联,也就是我的二抗,分子量大概150KD,我加的NHS和EDC的比例一般是1.2:1,量子点是巯基丙酸修饰的,量子点和EDC比例大概1:1000,一般先加EDC,NHS活化量子点半小时,再加1.2倍的IgG但是每次练完之后连上蛋白的量子点很少,用100KD的超滤管超滤后量子点位置几乎都没有荧光了,做了几次后面的免疫,效果都很差,比如EDC和NHS,我也换了其他的比例,但是效果都很差,我之前用BSA做完之后,做电泳效果还好…… 但是这个IgG总是连不上,跪求高人指导啊………………
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奋斗就有希望。
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zkwysw

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

lixuepu(金币+4): 2011-08-30 10:36:15
将2nmol 量子点加入50 uL 浓度为50 mM的EDC水溶液,
加入适量的抗体分子 (通常与量子点的数量比为5:1至10:1)
室温下温和振荡2小时,结束反应.
纯化
14楼2011-08-12 11:07:34
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