24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 5155  |  回复: 21
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lixuepu

金虫 (正式写手)

[求助] 量子点与抗体的偶联

最近在做一个量子点与羊抗猪的IgG的偶联,也就是我的二抗,分子量大概150KD,我加的NHS和EDC的比例一般是1.2:1,量子点是巯基丙酸修饰的,量子点和EDC比例大概1:1000,一般先加EDC,NHS活化量子点半小时,再加1.2倍的IgG但是每次练完之后连上蛋白的量子点很少,用100KD的超滤管超滤后量子点位置几乎都没有荧光了,做了几次后面的免疫,效果都很差,比如EDC和NHS,我也换了其他的比例,但是效果都很差,我之前用BSA做完之后,做电泳效果还好…… 但是这个IgG总是连不上,跪求高人指导啊………………
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

奋斗就有希望。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飞飞鱼yjf

新虫 (小有名气)

引用回帖:
1楼: Originally posted by lixuepu at 2011-07-03 16:12:07:
最近在做一个量子点与羊抗猪的IgG的偶联,也就是我的二抗,分子量大概150KD,我加的NHS和EDC的比例一般是1.2:1,量子点是巯基丙酸修饰的,量子点和EDC比例大概1:1000,一般先加EDC,NHS活化量子点半小时,再加1. ...

我最近也在做量子点与BSA相连,我用巯基乙酸修饰的量子点与BSA相连后用电泳分析,还用加了单独的量子点做对照,结果跑了后每个孔都没有条带,孔里也没荧光了。想请问下1楼的是怎么跑的电泳?谢谢。
16楼2011-10-04 15:52:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

lixuepu

金虫 (正式写手)

顶一下啊,别沉了…… 希望大家指导下
奋斗就有希望。
2楼2011-07-03 18:32:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinyubinglan

铁虫 (正式写手)

将军

【答案】应助回帖

lixuepu(金币+4): 谢谢额 2011-07-04 08:19:05
引用回帖:
Originally posted by lixuepu at 2011-07-03 16:12:07:
最近在做一个量子点与羊抗猪的IgG的偶联,也就是我的二抗,分子量大概150KD,我加的NHS和EDC的比例一般是1.2:1,量子点是巯基丙酸修饰的,量子点和EDC比例大概1:1000,一般先加EDC,NHS活化量子点半小时,再加1. ...

量子点与抗体连接,单独的EDC就可以,反应的PH值应该在酸性的条件下,一般在水中就可以,具体做法是先用EDC(不要加太多,这个很重要,要不量子点会沉淀,一般是量子点摩尔浓度的100倍就很好),活化羧基的QD,然后加入抗体。在反应几个小时,在摇床上效果更好。祝你成功。
3楼2011-07-03 20:26:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ruoruo051987

禁虫 (职业作家)

lixuepu(金币+3): 谢谢额 2011-07-04 08:19:19
本帖内容被屏蔽

4楼2011-07-03 21:05:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见