应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于限制性内切酶的失活
51/1返回列表
查看: 4179  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yuliansheng

金虫 (小有名气)

[求助] 关于限制性内切酶的失活

今天做实验，突然被一个问题蒙住了。学得不好，请高手们赐教。
在基因重组过程中，进行限制性内切酶酶切后，要对限制性内切酶的失活，每个酶都有自己对应的失活温度，我所用的酶组的失活温度是100°。这样的温度一下使我想起PCR的解链温度，大概也就在90多度。那试问一下，这样高的失活温度，不会导致基因双链分离吗？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
学习....
1楼 2011-07-01 17:16:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shusheng2006

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

嗯。楼上说得对。如果要进行第二步酶切也可以选择用酚氯仿简单抽提下～
赞一下 回复此楼
9楼2011-07-03 17:45:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖

★
dhd997(金币+1): 2011-07-01 19:29:53
没必要那么高吧，一般最高也就80℃了。
赞一下(1人) 回复此楼
Thank-you，so-blue.
2楼2011-07-01 17:21:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuliansheng

金虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2): 2011-07-01 19:30:06
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-07-01 17:21:27:
没必要那么高吧，一般最高也就80℃了。

我用的是TOYOBO东洋纺公司生产的限制性内切酶，每个酶都有自己严格的失活温度，所以必须按要求。比如，我用的是限制性内切酶SphⅠ和BglⅡ，这两个酶的失活温度全都是100° 5分钟。
赞一下(1人) 回复此楼
学习....
3楼2011-07-01 18:26:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)
★
dhd997(金币+1): 2011-07-01 19:30:11
即使高温基因双链分离后降温会重新成双链的。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-07-01 18:36:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +3 17501029541 2026-03-23 4/200 2026-03-23 23:47 by Txy@872106
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +4 pk3725069 2026-03-19 16/800 2026-03-23 23:09 by 汪！？！
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[基金申请] 学校已经提交到NSFC，还能修改吗？ 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +12 yangfz 2026-03-17 12/600 2026-03-21 03:30 by JourneyLucky
[考研] 332求调剂 +4 ydfyh 2026-03-17 4/200 2026-03-21 02:20 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +10 S.H1 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:51 by JourneyLucky
[考研] 288求调剂 +16 于海海海海 2026-03-19 16/800 2026-03-20 22:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:15 by JourneyLucky
[考研] 材料学硕297已过四六级求调剂推荐 +11 adaie 2026-03-19 11/550 2026-03-20 21:30 by laoshidan
[考研] 295复试调剂 +8 简木ChuFront 2026-03-19 8/400 2026-03-20 20:44 by zhukairuo
[考研] 招收调剂硕士 +4 lidianxing 2026-03-19 12/600 2026-03-20 12:25 by lidianxing
[考研] 一志愿中国海洋大学，生物学，301分，求调剂 +5 1孙悟空 2026-03-17 6/300 2026-03-19 23:46 by zcl123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭