24小时热门版块排行榜    

查看: 4200  |  回复: 9
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yuliansheng

金虫 (小有名气)

[求助] 关于限制性内切酶的失活

今天做实验,突然被一个问题蒙住了。学得不好,请高手们赐教。
在基因重组过程中,进行限制性内切酶酶切后,要对限制性内切酶的失活,每个酶都有自己对应的失活温度,我所用的酶组的失活温度是100°。这样的温度一下使我想起PCR的解链温度,大概也就在90多度。那试问一下,这样高的失活温度,不会导致基因双链分离吗?
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

学习....
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

4楼正解,要不PCR咋做。。。。PCR第二步不就是退火么。。。。

脑袋学傻了
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
6楼2011-07-01 22:37:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

【答案】应助回帖


dhd997(金币+1): 2011-07-01 19:29:53
没必要那么高吧,一般最高也就80℃了。
Thank-you,so-blue.
2楼2011-07-01 17:21:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yuliansheng

金虫 (小有名气)

★ ★
dhd997(金币+2): 2011-07-01 19:30:06
引用回帖:
Originally posted by susizheng at 2011-07-01 17:21:27:
没必要那么高吧,一般最高也就80℃了。

我用的是TOYOBO东洋纺公司生产的限制性内切酶,每个酶都有自己严格的失活温度,所以必须按要求。比如,我用的是限制性内切酶SphⅠ和BglⅡ,这两个酶的失活温度全都是100° 5分钟。
学习....
3楼2011-07-01 18:26:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)


dhd997(金币+1): 2011-07-01 19:30:11
即使高温基因双链分离后降温会重新成双链的。
4楼2011-07-01 18:36:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 279 分 求调剂 +3 睡个好觉_16 2026-03-24 3/150 2026-03-26 15:43 by zzll406
[考研] 081700 调剂 267分 +11 迷人的哈哈 2026-03-23 11/550 2026-03-26 15:41 by zzll406
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +9 Mr. Z 2026-03-25 9/450 2026-03-26 10:36 by baoball
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 打过很多竞赛,085406控制工程300分,求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +4 13831862839 2026-03-24 5/250 2026-03-25 09:47 by 无际的草原
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料,材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 7/350 2026-03-24 11:23 by 种大树
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 333求调剂 +3 ALULU4408 2026-03-23 3/150 2026-03-23 19:04 by macy2011
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 求调剂一志愿海大,0703化学学硕304分,有大创项目,四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
信息提示
请填处理意见