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snowrain0913新虫 (初入文坛)
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关于酵母启动子和质粒的问题
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| 酵母启动子有诱导型和组成型，每种都具体包括哪些呢？我想在酵母中上调一个基因，抑制一个基因，再引入一个外源的基因，都分别选择什么样的启动子和质粒呢？ |
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dfl204
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4楼2011-07-02 08:26:28
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【答案】应助回帖
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西瓜(金币+5, EPI+1): 很内行！ 2011-07-02 15:43:47
snowrain0913(金币+10): 十分感谢！ 2011-07-14 12:34:01
西瓜(金币+5, EPI+1): 很内行！ 2011-07-02 15:43:47
snowrain0913(金币+10): 十分感谢！ 2011-07-14 12:34:01
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看你的目的了 如果仅是基础研究： 上调一个基因可以利用游离质粒过表达这个基因，抑制某个基因到什么程度呢？可以的话就敲除吧。引入的外源基因可以选择不同标记的质粒表达即可。 如果涉及质粒稳定性或成本问题，可以选择整合型表达载体或构件一个expression cassette 或deletion cassette过表达或敲除某一基因。敲除可行与否看其互补链有无必须基因。如不能敲除，只能选择RNAi方法了。 引入的那个外源基因可以采用构件一个表达盒一步转入要敲除的基因座，这样是很方便的。 关于启动子，一般酿酒酵母常用的有GAL1、PGK1等都是强启动子，一个诱导型，一个组成型。 在比赤酵母里多用AOX1，甲醇诱导。 |
5楼2011-07-02 11:06:19
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