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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 荧光素酶是不是很容易失活啊？
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lzhwin

木虫 (正式写手)

[交流] 荧光素酶是不是很容易失活啊？ 已有3人参与

有一次做荧光素酶实验的时候样品很多，没注意严格冰上操作，结果上酶标仪读数全部没有酶活。
所以是不是说荧光素酶一旦被从细胞里裂解出来，室温下会很快丧失活性？
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1楼 2011-06-30 10:23:23
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mourning

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
裂解是室温啊，底物那一套加了吗？很好做的
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2楼2011-06-30 13:16:54
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lzhwin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by mourning at 2011-06-30 13:16:54:
裂解是室温啊，底物那一套加了吗？很好做的

promiga试剂盒里的protocal写的要冰上操作。
底物什么的肯定是在上酶标仪的时候由机器一个一个自动加啊。
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3楼2011-06-30 19:17:30
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mourning

木虫 (正式写手)
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引用回帖:
Originally posted by lzhwin at 2011-06-30 19:17:30:
promiga试剂盒里的protocal写的要冰上操作。
底物什么的肯定是在上酶标仪的时候由机器一个一个自动加啊。

说明书神马的俺记不得了，当年是在voxter上绑着震荡裂解，底物那些小心配好就可以了，荧光酶标仪没问题，就该考虑转染效率等了
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4楼2011-07-01 14:45:01
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lzhwin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by mourning at 2011-07-01 14:45:01:
说明书神马的俺记不得了，当年是在voxter上绑着震荡裂解，底物那些小心配好就可以了，荧光酶标仪没问题，就该考虑转染效率等了

其实，就是想问一下：如果加了裂解也震荡之后没有放冰上（比如在28度室温放了半小时），荧光素酶会不会失活？
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5楼2011-07-01 20:06:11
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mourning

木虫 (正式写手)
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Originally posted by lzhwin at 2011-07-01 20:06:11:
其实，就是想问一下：如果加了裂解也震荡之后没有放冰上（比如在28度室温放了半小时），荧光素酶会不会失活？

……做对照看看呗
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6楼2011-07-02 15:03:10
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tjegg

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
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Originally posted by lzhwin at 2011-07-01 20:06:11:
其实，就是想问一下：如果加了裂解也震荡之后没有放冰上（比如在28度室温放了半小时），荧光素酶会不会失活？

活性会有所下降，但不至于全部失活，可以与对照比较。
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除了你的亲人，没有人应该对你好，对你好的人，一定要珍惜。
7楼2011-07-02 16:53:37
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huangdi07

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
1782332楼: Originally posted by mourning at 2011-06-30 13:16:54:
裂解是室温啊，底物那一套加了吗？很好做的

楼主正在做荧光素酶 有pGL2么，能否赠予或交换呢 我现在也急用
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8楼2012-03-21 12:46:44
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lzhwin

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2375310楼: Originally posted by huangdi07 at 2012-03-21 12:46:44:
楼主正在做荧光素酶 有pGL2么，能否赠予或交换呢 我现在也急用

没有，不好意思
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9楼2012-03-21 22:41:47
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