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piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

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[求助] PCR-DGGE的问题

DGGE电泳后把每条带割下来，用30微升无菌水放4度冰箱过夜，随后吸取10微升为模板进行巢式PCR，扩出亮带，然后把每条带再跑二次DGGE，竟然每个样品（每个条带的PCR产物）跑出来的条带一致，并且条带很多，怎么回事呢？理论上讲不是再把每条带跑的话应该是一条带的，但实际上条带也太多了，郁闷的是每个样品跑出来的带是一样的。听同学说有跑一次DGGE回收胶测序的，我这种情况，想把第一次回收的每条带用不带GC夹的引物P一下测序，不知道可以不可以，做这一方面的虫友帮帮忙，谢谢！

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1楼 2011-06-28 19:04:19

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xiadongliang

金虫 (正式写手)

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性别: GG
专业: 环境微生物学

细菌污染把。
切胶这一步严格一些，严格避免空气中的细菌污染。

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2楼2011-06-29 13:09:33

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