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piaoyuaaa

金虫 (小有名气)

[求助] PCR-DGGE的问题

DGGE电泳后把每条带割下来,用30微升无菌水放4度冰箱过夜,随后吸取10微升为模板进行巢式PCR,扩出亮带,然后把每条带再跑二次DGGE,竟然每个样品(每个条带的PCR产物)跑出来的条带一致,并且条带很多,怎么回事呢?理论上讲不是再把每条带跑的话应该是一条带的,但实际上条带也太多了,郁闷的是每个样品跑出来的带是一样的。听同学说有跑一次DGGE回收胶测序的,我这种情况,想把第一次回收的每条带用不带GC夹的引物P一下测序,不知道可以不可以,做这一方面的虫友帮帮忙,谢谢!
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

细菌污染把。
切胶这一步严格一些,严格避免空气中的细菌污染。
2楼2011-06-29 13:09:33
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