24小时热门版块排行榜    

查看: 3702  |  回复: 14
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

sanmiao

木虫 (正式写手)


[交流] 氨氧化细菌PCR问题

氨氧化细菌PCR什么条件啊,我pCR时50度,55度,60度都试过,但是都没有P出过来啊!

我做的是土壤DNA,DNA是试剂盒提取的,做氨氧化古菌的时候条带非常亮!!!但是就是氨氧化细菌做不出来啊!

不知道其他人有没有做这个的啊,给点建议,谢谢啊!!!

[ Last edited by sanmiao on 2011-6-26 at 14:54 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

» 抢金币啦!回帖就可以得到:

查看全部散金贴

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

翰章

新虫 (小有名气)



sanmiao(金币+1):谢谢参与
(Rotthauwe et al. 1997)这篇文章里的条件应该是可以的,我做的也是土壤,P出来的效果很好
8楼2011-07-15 14:59:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
★ ★ ★ ★ ★
sanmiao(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+4, EPI+1): 2011-06-25 16:49:35
PCR这个跟你的菌没有什么关系,关键是看你的引物的退火温度如何,两个引物的TM值之和减去5,然后再上下各做几个温度梯度看看哪一个温度下P出来的条带最亮以后就选择那个退火温度了;
其实PCR的效果跟跟多因素有关系:模板 引物 退火温度 延伸时间 体系等等。。。。

不过祝你好运!
2楼2011-06-25 15:40:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuj2007

木虫 (正式写手)



sanmiao(金币+1):谢谢参与
一多看一下 外文文献,二看一些你PCR的引物是自己设计的还是文献中的,质量怎么样。 不行自己重新设计。
4楼2011-06-25 16:18:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sanmiao(金币+1):谢谢参与
你的菌是怎么处理的?直接菌落PCR?详细说下吧。
样品没处理好,DNA没释放出来,或者被降解掉,这也是可能的原因。
5楼2011-06-25 18:10:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +8 a089 2026-08-07 8/400 2026-08-14 18:46 by beefly
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-14 18:36 by 正能量1斤
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +22 医学老男孩 2026-08-13 48/2400 2026-08-14 18:33 by wuguocheng
[基金申请] filecode +6 cratir 2026-08-14 10/500 2026-08-14 18:29 by 笑叹辞穷
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
信息提示
请填处理意见