应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 氨氧化细菌PCR问题
51/1返回列表
查看: 3124  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

sanmiao

木虫 (正式写手)

[交流] 氨氧化细菌PCR问题

氨氧化细菌PCR什么条件啊，我pCR时50度，55度，60度都试过，但是都没有P出过来啊！

我做的是土壤DNA，DNA是试剂盒提取的，做氨氧化古菌的时候条带非常亮！！！但是就是氨氧化细菌做不出来啊！

不知道其他人有没有做这个的啊，给点建议，谢谢啊！！！

[ Last edited by sanmiao on 2011-6-26 at 14:54 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-06-25 15:32:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

837502131

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by xw111202105 at 2013-01-23 15:07:32
你用的是什么引物啊   我和你的情况正好相反啊   我古菌p不出来    细菌效果很好呢   古菌你用的啥引物    急

请问你氨氧化细菌pcr的具体体系和程序是什么呢？最好是带GC夹的，我的细菌p不出来，古菌好好的
赞一下 回复此楼
14楼2014-11-25 19:34:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★
sanmiao(金币+1):谢谢参与
dhd997(金币+4, EPI+1): 2011-06-25 16:49:35
PCR这个跟你的菌没有什么关系，关键是看你的引物的退火温度如何，两个引物的TM值之和减去5，然后再上下各做几个温度梯度看看哪一个温度下P出来的条带最亮以后就选择那个退火温度了；
其实PCR的效果跟跟多因素有关系：模板 引物 退火温度 延伸时间 体系等等。。。。

不过祝你好运！
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-06-25 15:40:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuj2007

木虫 (正式写手)
★
sanmiao(金币+1):谢谢参与
一多看一下 外文文献，二看一些你PCR的引物是自己设计的还是文献中的，质量怎么样。 不行自己重新设计。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-06-25 16:18:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★
sanmiao(金币+1):谢谢参与
你的菌是怎么处理的？直接菌落PCR？详细说下吧。
样品没处理好，DNA没释放出来，或者被降解掉，这也是可能的原因。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-06-25 18:10:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭