Originally posted by yuxia82012 at 2011-06-22 12:01:59:
你那个载体是怎么处理的？双酶切后电泳切胶回收的吗？回收完的载体有没有跑胶验证？还有最好把你的连接体系发上来让大家看看才能找到问题

Originally posted by peace12039088 at 2011-06-27 11:09:42:
这样的问题建议做电转化，效率会高些。此外目标片段与目标载体的比例不一定非要按照理论比例，可以依据回收后的电泳检测结果来加入，这样可能有点不科学，但我每次都是这样做出来的。还有就是电泳显示的同样亮度的 ...

Originally posted by cxwu10016869 at 2011-06-27 12:53:04:
1、插入片段：载体=3:1~10:1（摩尔数比）都可以，但插入片段不要太少了。
2、抗生素别出问题
3、注意连接酶的使用温度和方法；不同公司的酶连接时的温度不同，连接体系也会不同。

Originally posted by lihuaannie at 2011-06-22 11:32:46:
建议你把片段和载体的比例 再放大10:1都可以