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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » [求助]质粒消除
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30937747

木虫 (小有名气)

[求助] [求助]质粒消除

我做的是阴性菌,先前把一个质粒电转到宿主菌里面,现在想把质粒消除掉,请问有什么好的办法.
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我依旧会努力.
1楼 2011-06-15 08:06:13
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-15 19:36:00
30937747(金币+2): 我是这样做的.但是没有成功.都转到第8批了 2011-06-19 10:05:53
质粒上如果有抗性，那就把含有质粒的菌在没有加抗生素的液体培养基里培养，在没有抗生素这个选择压力下，质粒不扩增，随着菌的世代增长，新生代菌体内质粒拷贝数越来越少，到一定时间后就会产生不含质粒的菌。这时候就将菌液在不含抗生素的平板上涂布，再把长出来的含有或者不含有质粒的菌点到不含有抗生素的平板上，长出菌落之后再点到含有抗生素的平板上（用牙签的钝头点，保证接种数量够多），不能长出来的就是不含有质粒的，不含有抗生素的平板上生长的相应菌落就是想要的阴性菌了。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
4楼2011-06-15 15:46:32
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

★ ★ ★
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-15 19:35:50
30937747(金币+2): 我先学习学习.谢谢啦 2011-06-19 10:04:38
呵呵，实验室的一个师姐曾经用 核酸研究 上的一篇老文献上的方法消除的，一次成功。

Curing of a plasmid from E.coli using high-voltage electroporation

全文链接：

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/ ... f/nar00140-0609.pdf
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The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-06-15 12:45:53
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
貌似将菌液在摇床上摇上几天就可以去除里面的质粒。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-06-15 15:38:44
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
不用很麻烦，就是涂板接种之类的简单操作。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2011-06-15 15:47:35
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