| 查看: 1811 | 回复: 4 | ||||
| 本帖产生 2 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||||
30937747木虫 (小有名气)
|
[求助]
[求助]质粒消除
|
|||
| 我做的是阴性菌,先前把一个质粒电转到宿主菌里面,现在想把质粒消除掉,请问有什么好的办法. |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有169人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大肠杆菌基因重组时PKD46高温怎么都消除不了
已经有25人回复
- 空白也PCR出的两条带
已经有19人回复
- 【求助/交流】如何提取不带质粒的细菌总DNA？
已经有7人回复
- 【求助/交流】消除质粒
已经有8人回复
- 【求助/交流】微生物基因敲除请进
已经有8人回复
- 【分享】DNA重组实验中的部分技术
已经有159人回复
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - MolEPI: 106
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16348.8
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3652
- 在线: 289小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
3楼2011-06-15 15:38:44
brightfuture01
木虫之王 (文坛精英)
我爱打老虎
- MolEPI: 14
- 应助: 24 (小学生)
- 贵宾: 1.2
- 金币: 113363
- 散金: 1526
- 红花: 224
- 沙发: 1
- 帖子: 28943
- 在线: 3684.8小时
- 虫号: 464575
- 注册: 2007-11-21
- 性别: GG
- 专业: 神经生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-15 19:35:50
30937747(金币+2): 我先学习学习.谢谢啦 2011-06-19 10:04:38
amisking(金币+3, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-15 19:35:50
30937747(金币+2): 我先学习学习.谢谢啦 2011-06-19 10:04:38
|
呵呵，实验室的一个师姐曾经用 核酸研究 上的一篇老文献上的方法消除的，一次成功。 Curing of a plasmid from E.coli using high-voltage electroporation 全文链接： http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/ ... f/nar00140-0609.pdf |
2楼2011-06-15 12:45:53
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MolEPI: 46
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19461.4
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6587
- 在线: 2777.7小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
【答案】应助回帖
★ ★
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-15 19:36:00
30937747(金币+2): 我是这样做的.但是没有成功.都转到第8批了 2011-06-19 10:05:53
amisking(金币+2, EPI+1): 鼓励应助 2011-06-15 19:36:00
30937747(金币+2): 我是这样做的.但是没有成功.都转到第8批了 2011-06-19 10:05:53
| 质粒上如果有抗性，那就把含有质粒的菌在没有加抗生素的液体培养基里培养，在没有抗生素这个选择压力下，质粒不扩增，随着菌的世代增长，新生代菌体内质粒拷贝数越来越少，到一定时间后就会产生不含质粒的菌。这时候就将菌液在不含抗生素的平板上涂布，再把长出来的含有或者不含有质粒的菌点到不含有抗生素的平板上，长出菌落之后再点到含有抗生素的平板上（用牙签的钝头点，保证接种数量够多），不能长出来的就是不含有质粒的，不含有抗生素的平板上生长的相应菌落就是想要的阴性菌了。 |
4楼2011-06-15 15:46:32
冼亮淀粉酶
专家顾问 (知名作家)
生物大分子降解酶
-
专家经验: +248 - MolEPI: 46
- 应助: 257 (大学生)
- 贵宾: 0.272
- 金币: 19461.4
- 散金: 1704
- 红花: 121
- 帖子: 6587
- 在线: 2777.7小时
- 虫号: 856414
- 注册: 2009-09-25
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
- 管辖: 微生物
5楼2011-06-15 15:47:35
6