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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 关于液质检测药物浓度的问题
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axiong8702

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于液质检测药物浓度的问题

我想检测动物组织脏器药物分布浓度，请教一下，各脏器进液质之前的前处理是否相同？具体该如何操作？
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1楼 2011-06-14 22:06:42
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破土草儿

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
karl2100(金币+1, EPI+1): 谢谢指教！ 2011-06-21 21:07:50
引用回帖:
Originally posted by axiong8702 at 2011-06-14 22:06:42:
我想检测动物组织脏器药物分布浓度，请教一下，各脏器进液质之前的前处理是否相同？具体该如何操作？

1、质谱电离需要注意的一些要点：
       不知道你所要分析的物质的性质及电离的方式如何？如果电离效率不太好，可以加点儿甲醇（利于之子转移），还有你的溶液中也可以加入一点挥发性的阳离子、阴离子盐利于电离！
       质谱定量，分辨率高，除经典电离外质谱定量的重现性低，但是如果你用ESI电离话，可以教你一个既可以保证分辨率，也可以保证重现性，可以用内标法，根据峰面积的比例进行定量，R2可以达到0.99.
2、样品前处理
      制备样品时，可以用匀浆剂（甲醇或者乙腈，NaOH和缓冲液等）匀浆，离心，沉淀，得到前处理样品。此种获得的上清液中还可以进一步（或者在匀浆时同时萃取)萃取所要分离的物质，上面所用到方法就为蛋白沉淀法和液液萃取法。若果这样所得到前处理样品干扰物质效果不好（还有蛋白质、磷脂等），前处理样品再用SPE（但此种方法回收率比较低），一般可以达到有不错的效果。之后挥干所得到的前处理样品，用流动相复溶样品，上样！
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5楼2011-06-21 12:18:25
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jiangchunyong

荣誉版主 (文坛精英)

【答案】应助回帖

给你顶起来 让别人帮忙
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2楼2011-06-15 11:39:26
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nrzhw

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
jiangchunyong(金币+1): 谢谢！ 2011-06-15 12:31:43
axiong8702(金币+1): 谢谢~~文献上的处理方法都不太一样，我还想问一下，只是进行去蛋白处理就行，还是需要加入什么裂解液等，让我的药充分游离出来呢？望赐教，呵呵 2011-06-17 11:48:58
各组织器官取出后，进行组织匀浆，之后可以选择高速离心，取上清，用甲醇或乙腈充分沉淀蛋白后再次离心，取上清，过滤进质谱分析就可以了。
各组织器官的处理方法尽量相同，以比较药物在不同组织中的分布情况。
这个方法供你参考，看看是否会有帮助。
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3楼2011-06-15 12:29:16
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yyoooy

铜虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1): 多谢指教！ 2011-06-20 20:03:18
引用回帖:
Originally posted by nrzhw at 2011-06-15 12:29:16:
各组织器官取出后，进行组织匀浆，之后可以选择高速离心，取上清，用甲醇或乙腈充分沉淀蛋白后再次离心，取上清，过滤进质谱分析就可以了。
各组织器官的处理方法尽量相同，以比较药物在不同组织中的分布情况。
...

通常做法是匀浆，  首先加入组织，然后可加入匀浆剂（甲醇或乙腈，具体情况还需根据药物溶解度看，尽量选用能够充分溶解药物的溶剂），比例大概200mg：1mL 之后匀浆。匀浆之后使用超声仪超声15-30分钟（细胞在这部分已经基本全部破裂），然后高速离心后取上清液进行处理，如果你的药物浓度不高或监测下限较高 你可以进一步吹干浓缩。之后进质谱。 不需要细胞裂解液。
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4楼2011-06-20 19:44:35
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