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墨池

银虫 (小有名气)

[求助] 这胶是怎么了?小女子求解

各位大虾,我染出来的胶为什么上部颜色浅,下部颜色深呢(背景色),奇怪很,求解?变性聚丙烯酰胺凝胶,染色是银染法(强碱)
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阳光暖暖的,心情暖暖的,努力做个精致的女人!
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特洛伊

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): 很好的建议 2011-06-22 16:57:32
墨池(金币+3): 2011-06-23 09:36:47
从银染的结果图,我给你几点建议:
1.PCR在体系还要进一步优化,特别是模板浓度。
2.所选的marke和你扩增片段范围不是很吻合,建议选用弄够覆盖整个目的片段区域的marker。
3.银染的效果不理想,主要从试验的固定、染色、脱色及所用试剂着手。当中最重要的就是时间、及显影色的温度。银染已有经典的试验流程,严格按照流程做就不会出现这些问题,同时依据自己试验,摸索也很重要。
希望能对你有所帮助!
成本
7楼2011-06-22 16:39:50
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墨池

银虫 (小有名气)

★ ★
dhd997(金币+2): 可以在第一楼编辑 2011-06-21 09:27:39
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-06-14 13:11:48:
无图无真相。

图片已上传,望解答,谢谢哈
阳光暖暖的,心情暖暖的,努力做个精致的女人!
3楼2011-06-14 16:47:39
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ahzc2009

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): 鼓励应助 2011-06-21 08:50:52
墨池(金币+1): 2011-06-22 15:50:17
你这胶看起来有点奇怪啊,呵呵。初步看来应该不是胶的问题,因为Maker上下都是均匀的,下面也只是点样孔里颜色比较深,应该是样品的问题(比如小分子量的蛋白比较多)。建议脱色和染色找到上下的平衡点以达到最佳的观察效果。不知道对不对,我只是对照图这样分析,希望对您有帮助
宠辱不惊,闲看庭前花开花落;去留无意,漫随天外云卷云舒
4楼2011-06-21 08:11:01
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ahzc2009

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

墨池(金币+1): 2011-06-22 15:50:26
还有,下面的颜色较深的地方都没有汇聚成明显的带,不知道你注意了没有?
宠辱不惊,闲看庭前花开花落;去留无意,漫随天外云卷云舒
5楼2011-06-21 08:14:10
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