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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 这胶是怎么了？小女子求解
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墨池

银虫 (小有名气)

[求助] 这胶是怎么了？小女子求解

各位大虾，我染出来的胶为什么上部颜色浅，下部颜色深呢（背景色），奇怪很，求解？变性聚丙烯酰胺凝胶，染色是银染法（强碱）
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阳光暖暖的，心情暖暖的，努力做个精致的女人！
1楼 2011-06-14 11:23:39
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
无图无真相。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
2楼2011-06-14 13:11:48
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墨池

银虫 (小有名气)
★ ★
dhd997(金币+2): 可以在第一楼编辑 2011-06-21 09:27:39
引用回帖:
Originally posted by 天使托 at 2011-06-14 13:11:48:
无图无真相。

图片已上传，望解答，谢谢哈
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阳光暖暖的，心情暖暖的，努力做个精致的女人！
3楼2011-06-14 16:47:39
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ahzc2009

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): 鼓励应助 2011-06-21 08:50:52
墨池(金币+1): 2011-06-22 15:50:17
你这胶看起来有点奇怪啊，呵呵。初步看来应该不是胶的问题，因为Maker上下都是均匀的，下面也只是点样孔里颜色比较深，应该是样品的问题（比如小分子量的蛋白比较多）。建议脱色和染色找到上下的平衡点以达到最佳的观察效果。不知道对不对，我只是对照图这样分析，希望对您有帮助
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宠辱不惊，闲看庭前花开花落；去留无意，漫随天外云卷云舒
4楼2011-06-21 08:11:01
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ahzc2009

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

墨池(金币+1): 2011-06-22 15:50:26
还有，下面的颜色较深的地方都没有汇聚成明显的带，不知道你注意了没有？
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宠辱不惊，闲看庭前花开花落；去留无意，漫随天外云卷云舒
5楼2011-06-21 08:14:10
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墨池

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by ahzc2009 at 2011-06-21 08:11:01:
你这胶看起来有点奇怪啊，呵呵。初步看来应该不是胶的问题，因为Maker上下都是均匀的，下面也只是点样孔里颜色比较深，应该是样品的问题（比如小分子量的蛋白比较多）。建议脱色和染色找到上下的平衡点以达到最佳 ...

关于“脱色和染色上下平衡点”，具体要怎么操作，谢谢哈哈
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阳光暖暖的，心情暖暖的，努力做个精致的女人！
6楼2011-06-22 15:51:13
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特洛伊

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): 很好的建议 2011-06-22 16:57:32
墨池(金币+3): 2011-06-23 09:36:47
从银染的结果图，我给你几点建议：
1.PCR在体系还要进一步优化，特别是模板浓度。
2.所选的marke和你扩增片段范围不是很吻合，建议选用弄够覆盖整个目的片段区域的marker。
3.银染的效果不理想，主要从试验的固定、染色、脱色及所用试剂着手。当中最重要的就是时间、及显影色的温度。银染已有经典的试验流程，严格按照流程做就不会出现这些问题，同时依据自己试验，摸索也很重要。
希望能对你有所帮助！
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成本
7楼2011-06-22 16:39:50
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wangyitao

金虫 (小有名气)
★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励下 2011-06-23 19:38:39
更换电泳液试一下
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8楼2011-06-22 17:05:57
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毛妞

铁虫 (初入文坛)
★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-23 19:38:26
更换电泳液看看，我之前用琼脂糖跑的电泳和你的差不多，上面是白的。我的电泳液是放了很长时间的，后来换了新的电泳液就好了。
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我行我素
9楼2011-06-23 19:21:23
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