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悦迷008

木虫 (著名写手)

[求助] 关于葡聚糖凝胶G-100的流速和压力问题

用葡聚糖凝胶G-100分离蛋白质时,层析柱的流速和压力怎么控制才能有一个比较好的分离效果?希望做过类似实验的朋友帮忙解答一下,谢谢!
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冼亮淀粉酶

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生物大分子降解酶


西瓜(金币+1): 专家来了 2011-08-29 16:41:44
有说明书的按照说明书,自装的就让它自然流速别加压
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
2楼2011-06-09 15:31:36
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★ ★ ★
amisking(金币+3): 鼓励应助 2011-06-09 18:06:25
G100的流速不能太快的,反而是太快才会影响分离效果,如果是自己装的,压力最好是自然流速,假如想再快一点也不能快太多。G100我装的1.6厘米直径的流速差不多是0.8ml/min,S200预装柱也是用1ml/min。
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4楼2011-06-09 17:24:39
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冼亮淀粉酶

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我是不大看好分子排阻的,分离效果我觉得不好。
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5楼2011-06-09 17:25:27
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做了之后把图发上来再说,虽然我不大看好分子筛,但还是祝好吧。
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7楼2011-06-13 17:28:43
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悦迷008: 回帖置顶 2012-03-23 12:33:41
引用回帖:
8楼: Originally posted by tz1301060311 at 2011-08-29 10:06:15:
0.8ml/min,这达不到G100的设计参数啊,这流速,V0体积能达到6ml/g?

你的资料也共享一下吧,还有你的操作经验。
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9楼2011-08-29 16:36:31
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引用回帖:
2419309楼: Originally posted by 七AND七 at 2012-07-03 10:11:09
你好!最近也在用G100分离多糖,自己已经装了好几次柱子了但是每次平衡的时候流速能达到3-4s 一滴  平衡最后流速就开始减慢了 上样后流速就更慢了  一分钟一滴的感觉  请问是哪里出了问题?我的样品还在里面呢...

可能样品把填料给堵了,也可能是填料本身就质量差。
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12楼2012-07-03 14:09:22
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引用回帖:
2434727楼: Originally posted by zcczj at 2012-08-29 22:23:59
你装1.6厘米的,装多高啊,我想装100的,总是装不匀,一到中间30厘米就开始不均匀了,装了很多次都装不好,郁闷啊...

不超过30厘米
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14楼2012-08-30 01:18:05
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引用回帖:
2434822楼: Originally posted by zcczj at 2012-08-30 10:54:29
这么短?能分开?我看别人装了55厘米的呢...

呵呵,自己装的分得不好,后来用预装的G250也分不好。
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16楼2012-08-30 14:20:04
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引用回帖:
19楼: Originally posted by carrol821122 at 2014-03-18 21:24:41
那请问不用葡聚糖凝胶柱,还可以用什么来分离多糖嗯?找了好多,很想避开这个柱子,很闹心的,谢谢赐教...

还有其它分离方法的,多看论文,上面应该写有。
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20楼2014-03-18 21:40:32
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