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lingyu20071001

银虫 (小有名气)

[求助] puc19能作为表达载体用吗/

puc19能作为表达载体用吗?有没有用过？具体怎么做呢？需要IPTG诱导吗？
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1楼 2011-06-08 10:59:31
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zhouying_613

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5): 欢迎新虫交流！ 2011-06-08 18:52:59
PUC19这能作为中间载体，不能作为表达载体。需要IPTG诱导
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2楼2011-06-08 12:16:22
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-08 18:53:33
lingyu20071001(金币+1): 2011-07-11 12:05:48
作为克隆载体用的，通常不是用于表达载体，带LacZ基因，在IPTG和X-gal的氨卞板子上长，pUC19质粒会使菌落变蓝。
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3楼2011-06-08 13:06:14
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lingyu20071001

银虫 (小有名气)
应该可以的吧，不是有Lac启动子吗？用IPTG诱导表达不行吗？查了资料说可能因为载体拷贝数太高，容易产生本底表达
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4楼2011-06-08 14:01:25
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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen
关键是看你做什么用途了。。。
如果想表达基因的话，最好还是带上基因自身的启动子。。。
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Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
5楼2011-06-08 14:16:22
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yabxxh

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

lingyu20071001(金币+1): 2011-07-11 12:05:43
为啥非要用克隆专用载体来做表达呢，呵呵
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6楼2011-06-08 14:38:05
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475502411

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

lingyu20071001(金币+1): 2011-07-11 12:05:37
一般是不这样用的，你说的那个事克隆载体，为何不选用表达载体呢？
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可以朝九晚五，也能浪迹天涯
7楼2011-06-08 17:00:50
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shuifen1108

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, EPI+1): Good!高拷贝是一个，DNA酶缺陷也是克隆载体的另一个优点。有的表达载体还有蛋白酶缺陷，可以过表达目的蛋白。 2011-06-08 22:28:29
lingyu20071001(金币+7): 2011-07-11 12:05:28
克隆载体ＰＵＣ１９具有表达功能这是毋庸置疑的，否则抗性基因怎么表达？阳性克隆载体怎么筛选？表达载体主要区别于克隆载体的在于其表达的可控性，具有增强子、启动子等元件，基因的表达可以受到诱导剂等的控制。克隆载体的优点一般是高拷贝（当然也有例外如BAC等）,而表达载体则不一定需要高的拷贝数。一家之言，仅供参考。
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8楼2011-06-08 21:46:11
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
引用回帖:
Originally posted by shuifen1108 at 2011-06-08 21:46:11:
克隆载体ＰＵＣ１９具有表达功能这是毋庸置疑的，否则抗性基因怎么表达？阳性克隆载体怎么筛选？表达载体主要区别于克隆载体的在于其表达的可控性，具有增强子、启动子等元件，基因的表达可以受到诱导剂等的控制。 ...

额，我错了。大家讨论的是质粒，我在上楼的评贴里扯到菌去了。
特此更正，大家勿要被误导……不好意思！
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9楼2011-06-09 10:45:38
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