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阿修罗Axuro

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
amisking(金币+4, EPI+1): 鼓励发帖交流 2011-06-07 20:34:42
sdwq(金币+5): 很详细,谢谢! 2011-06-08 08:21:13
据我的了解
Klenow片段是负责合成的,有3’→5’外切核酸酶(校正)活性,所以可以切掉3端的单链,现在的TAQ酶,都是由Klenow片段负责合成,而同时一般还会有一到两种校正活性以保证复制的正确性。由于大部分的酶切后产生的粘性末端都是5’端单链,所以Klenow片段在试验中常利用其5’→3’聚合酶活性合成特性,用于补平酶切后产生的粘性末端,现在的高保真酶如pfu等也可用于来补平粘性末端。而普通TAQ酶无法用于补平是因为普通TAQ酶会在末端加A尾。
关于其相关原理,可以参考生物化学的书,上面写得十分详细。
4楼2011-06-07 17:09:57
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