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外切核酸酶(校正)活性是什么意思
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"Klenow Fragment是DNA Polymerase I (大肠杆菌)的大片段。该酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切核酸酶(校正)活性，但是缺乏DNA polymerase I所具有的5’→3’外切核酸酶活性。" 3’→5’外切核酸酶(校正)活性是什么意思？ |
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【答案】应助回帖
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amisking(金币+4, EPI+1): 鼓励发帖交流 2011-06-07 20:34:42
sdwq(金币+5): 很详细，谢谢！ 2011-06-08 08:21:13
amisking(金币+4, EPI+1): 鼓励发帖交流 2011-06-07 20:34:42
sdwq(金币+5): 很详细，谢谢！ 2011-06-08 08:21:13
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据我的了解 Klenow片段是负责合成的，有3’→5’外切核酸酶(校正)活性，所以可以切掉3端的单链，现在的TAQ酶，都是由Klenow片段负责合成，而同时一般还会有一到两种校正活性以保证复制的正确性。由于大部分的酶切后产生的粘性末端都是5’端单链，所以Klenow片段在试验中常利用其5’→3’聚合酶活性合成特性，用于补平酶切后产生的粘性末端，现在的高保真酶如pfu等也可用于来补平粘性末端。而普通TAQ酶无法用于补平是因为普通TAQ酶会在末端加A尾。 关于其相关原理，可以参考生物化学的书，上面写得十分详细。 |
4楼2011-06-07 17:09:57
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