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求叶绿素合成中间产物ALA的测定方法，最后是做过的。
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【答案】应助回帖
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xiaohouo0(金币+5, APEPI+1): 感谢积极应助，很详细！ 2011-08-17 14:28:47
xiaohouo0(金币+5, APEPI+1): 感谢积极应助，很详细！ 2011-08-17 14:28:47
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我刚好前一阵子测了叶绿素的一系列前体物质，当然包括ALA。 δ-氨基乙酰丙酸ALA的测定： 1）取新鲜水稻叶片5克，用5ml 4%的三氯乙酸（w/v）及少量石英砂研磨三次，合并上清液并定容至20ml。（此步骤也可在液氮中研磨然后加入三氯乙酸）。 2）18000g离心15分钟。 3）取5ml上清液加入2.35ml醋酸钠（1mol/L）和0.15ml乙酰丙酮。沸水浴10分钟后冷却至室温。 4）取其中的2ml加入2ml显色液（Ehrlich-Hg试剂）黑暗下15分钟后测553nm的OD值。 这是测定ALA的相对含量，最后如果要定量的话可以用A553/A525l来代表其含量。 Ehrlich-Hg试剂：1g P-二甲氨基苯甲醛溶解于30mL冰醋酸中，加入8mL70%的高氯酸（高氯酸遇有机溶剂易爆炸），用冰醋酸稀释到50mL，最后加入0.2g升汞。此溶液存于棕色瓶中，外面用锡纸包裹，可以在4℃长期保存。 |
2楼2011-08-16 19:42:46
3楼2012-11-19 14:26:24