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1970-01-01 08:00:00
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智能机器人

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我们都爱小木虫

lixiang2012

铜虫 (初入文坛)

有一点疑问,在测553nm下的OD值时。是用什么作参比对照呢?还有Ehrlich试剂可以用买的吗?
3楼2012-11-19 14:26:24
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yuoulvjia

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
xiaohouo0(金币+5, APEPI+1): 感谢积极应助,很详细! 2011-08-17 14:28:47
我刚好前一阵子测了叶绿素的一系列前体物质,当然包括ALA。
δ-氨基乙酰丙酸ALA的测定:
1)取新鲜水稻叶片5克,用5ml 4%的三氯乙酸(w/v)及少量石英砂研磨三次,合并上清液并定容至20ml。(此步骤也可在液氮中研磨然后加入三氯乙酸)。
2)18000g离心15分钟。
3)取5ml上清液加入2.35ml醋酸钠(1mol/L)和0.15ml乙酰丙酮。沸水浴10分钟后冷却至室温。
4)取其中的2ml加入2ml显色液(Ehrlich-Hg试剂)黑暗下15分钟后测553nm的OD值。
这是测定ALA的相对含量,最后如果要定量的话可以用A553/A525l来代表其含量。
Ehrlich-Hg试剂:1g P-二甲氨基苯甲醛溶解于30mL冰醋酸中,加入8mL70%的高氯酸(高氯酸遇有机溶剂易爆炸),用冰醋酸稀释到50mL,最后加入0.2g升汞。此溶液存于棕色瓶中,外面用锡纸包裹,可以在4℃长期保存。
2楼2011-08-16 19:42:46
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