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biofeixue

木虫 (著名写手)

[求助] DEPC水能不能重复利用?

DEPC水配好后,能不能多次泡EP管?
DEPC水是不是一定要搅拌混匀?能不能多放一段时间让他自己溶解?
用来溶RNA的DEPC及配75%乙醇的DEPC能不能配好,灭菌后多次使用?
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
biofeixue(金币+10): 谢谢! 2011-05-30 09:13:05
咸鱼(金币+10): 奖励应助回帖。对3,我有异议,我觉得可以~ 2011-05-31 12:23:39
1.DEPC水配好后,能不能多次泡EP管
不推荐,因为效果不好
2.DEPC水是不是一定要搅拌混匀,能不能多放一段时间让他自己溶解
可以,但是一般溶解效果不好,最好还是搅拌,可以用磁力搅拌器,省时省力
3.用来溶RNA的DEPC及配75%乙醇的DEPC能不能配好,灭菌后多次使用
最好不要,现配先用,保证效果
PS:
做RNA很麻烦的
最好是事先计划好
所有的一次做完
全部做成cDNA冻存起来
再慢慢往下做
其实可以买厂家已经处理好的,RNAse free和DNAse free的EP管和枪头
青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
2楼2011-05-30 08:57:47
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biofeixue

木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by jhu132llh at 2011-05-30 08:57:47:
1.DEPC水配好后,能不能多次泡EP管
不推荐,因为效果不好
2.DEPC水是不是一定要搅拌混匀,能不能多放一段时间让他自己溶解
可以,但是一般溶解效果不好,最好还是搅拌,可以用磁力搅拌器,省时省力
3.用来溶R ...

磁力搅拌器,不会把它污染吗?
3楼2011-05-31 04:43:23
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jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪

可以处理一下的呀
青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
4楼2011-05-31 12:01:40
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咸鱼

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by biofeixue at 2011-05-31 04:43:23:
磁力搅拌器,不会把它污染吗?

我们都是装1LddH2O到1L的那种有盖瓶中,然后加500ulDEPC到其中,使劲摇呀摇,直到瓶底看不到油状颗粒,然后37度培养箱过夜,第二天再122度灭菌40min。然后放到我们专放RNA相关试剂的柜子里,放好长时间都可以用,只要不污染。

DEPC是除去RNA酶,除去后灭菌后DEPC也降解了,如果操作小心,不污染,里面应该不会有RNA酶了,我觉得就可以用来做RNA相关实验。

不用磁力搅拌器也可以,可以装到那种有盖子的瓶子里放到37度摇床摇过夜,如果你们摇床可以的话。我们原来有个可以这么干的摇床,坏了以后我们就手动摇的~
5楼2011-05-31 12:28:54
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cosmosmid

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
jhu132llh(金币+3): good 2011-07-14 17:01:06
DEPC是用来去除水中的RNA酶的,最好的方式是搅拌过夜,震荡效果不好。
高压灭菌的目的一是除菌,再有就是蒸出剩余的DEPC,此步骤会有挥发性的毒气,原则上需要通风。
提取RNA最关键的是尽快去除内源性RNA酶,一般的器具并不需要使用DEPC处理,订购使用进口的耗材,应该不会引起降解。
我的理解,在离开Tizol之前不许考虑RNase。
6楼2011-07-14 15:11:24
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a3yangfei

铁虫 (初入文坛)

DEPC是要搅拌过夜才可以用的,因为易挥发,泡EP管的DEPC水,一周就换一次。用高温处理过的DEPC水配置75%乙醇和溶解RNA,不染菌的情况下可以长期用。但是最好定期换一次。RNA很坚强的。
7楼2011-07-25 22:53:29
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跳动的RNA

禁言 (初入文坛)


SongQ5285(金币+1): 交流 2012-01-13 11:20:32
本帖内容被屏蔽

8楼2012-01-13 10:12:29
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

★ ★
SongQ5285(金币+2): 交流 2012-01-13 20:50:47
用来溶RNA的DEPC水,我一般是一次配好,高温灭菌,分装在经DEPC处理的EP管里,-20度保存,一次用一管
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
9楼2012-01-13 18:50:23
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fanfenggui

金虫 (正式写手)

★ ★
SongQ5285(金币+2): 交流 2012-01-16 11:22:13
搅拌省事省力,放到通风橱里盖上锡箔纸就行了。可以把处理过的枪头捞出来单独灭菌,这样depc水可以多用几次,但是考虑到挥发,一周后就该换新的了!
爱由心起!
10楼2012-01-16 09:54:54
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