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alden127

新虫 (小有名气)

[交流] 关于Elisa实验中吸光度值衰减的问题已有3人参与

最近在elisa实验中发现一个问题:加完显色液(购买)显色一定时间后,再加终止液(2M H2SO4,自己配制)后,立即测试其吸光度值,等过几分钟再测试吸光度值,发现两次测得的吸光度值发生衰减。第二次均小于第一次。
    而且还有一个奇怪的现象:加终止液时,从第一条加到第12条后,测试发现,吸光度值从1-12条逐级衰减。前提是这12条酶标板都是同一种产品,并且包被相同蛋白。

    有没有其他虫友发现这问题,请来讨论和指点下。
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yaojc

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
silicare(金币+5, EPI+1): 2011-05-25 12:10:49
1、可能你购买的显色液质量不是很好,一般情况下,终止反应后OD值的下降前期不是很明显。
2、分析12条显示逐级递减的原因
a:显色时间调整,如果你现在的显色时间是10MIN,那调整到30MIN,再加终止液,观察上述现象是否出现。
b:终止液中加入少量甘油看下怎么样。
祝试验顺利。
专注、专心、专业
4楼2011-05-25 11:03:16
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yaojc

木虫 (正式写手)

1%好像是
专注、专心、专业
6楼2011-05-25 16:50:42
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