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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白pI=4.21，缓冲液的选择？
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99521

木虫 (小有名气)

[求助] 蛋白pI=4.21，缓冲液的选择？

我要纯化一个蛋白，pI=4.21, 应该选择什么缓冲液？
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坚持下去就是胜利~~~
1楼 2011-05-23 10:43:06
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小新3858

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

99521(金币+1): 谢谢！能具体说一下选什么缓冲液么？ 2011-05-23 11:15:49
一般纯化蛋白时，缓冲液的pH要低于或高于蛋白质的等电点1左右，这个蛋白的等电点这么低，可以选pH5~6的缓冲液
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2楼2011-05-23 10:52:58
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小新3858

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

99521(金币+1): 非常感谢！ 2011-05-23 14:33:46
20mM的PB或PBS，另外还可以根据需要加一些其他添加剂
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3楼2011-05-23 11:20:28
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deblway

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

99521(金币+1): 谢谢！ 2011-05-23 15:29:24
柠檬酸-柠檬酸盐缓冲液应该是可以用的。。。楼主可以试下。。
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海贼王！哥当定了。。。。
4楼2011-05-23 11:32:30
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royhahaha

木虫 (小有名气)
引用回帖:
183555楼: Originally posted by 小新3858 at 2011-05-23 11:20:28
20mM的PB或PBS，另外还可以根据需要加一些其他添加剂

请教下，一般的蛋白缓冲液的话都会加些什么添加剂？比如说抗体缓冲液里面应该加些什么喔
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5楼2012-06-20 13:21:03
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小新3858

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2415477楼: Originally posted by royhahaha at 2012-06-20 13:21:03
请教下，一般的蛋白缓冲液的话都会加些什么添加剂？比如说抗体缓冲液里面应该加些什么喔...

这个要看你蛋白的性质，是不是够稳定，疏水性大小之类的，像我之前做过的一个蛋白疏水性比较强，很不稳定，就加了2M的脲作为保护剂，不一样的蛋白需要加的东西也不一样，也可能蛋白稳定不用加什么添加剂。
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6楼2012-06-20 19:50:06
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royhahaha

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2415602楼: Originally posted by 小新3858 at 2012-06-20 19:50:06
这个要看你蛋白的性质，是不是够稳定，疏水性大小之类的，像我之前做过的一个蛋白疏水性比较强，很不稳定，就加了2M的脲作为保护剂，不一样的蛋白需要加的东西也不一样，也可能蛋白稳定不用加什么添加剂。...

谢谢了
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7楼2012-06-21 08:26:58
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

20mM的pH=7.4的Tris-cl缓冲液过DEAE
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8楼2012-06-21 10:53:28
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