| 查看: 1416 | 回复: 8 | ||||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | ||||
[交流]
细胞问题
|
||||
|
有谁知道细胞的固定方法还有哪些？（除了用适体固定和用玻璃固定）最好附上方法或文献！ 还有谁知道BGC细胞是贴壁细胞吗？如果用缓冲液洗的话会不会被冲掉？ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
为呼吸打开通道：依伐卡托的科学之旅
已经有1人回复
-
Dordaviprone（ONC201）：小分子药物在中线胶质瘤中的应用
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有270人回复
-
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展
已经有1人回复
-
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展
已经有0人回复
-
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘
已经有1人回复
-
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展
已经有0人回复
-
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选
已经有0人回复
-
MCC950：NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景
已经有0人回复
-
康替唑胺研发17年：如何解决多重耐药菌感染难题
已经有0人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
广西锰资源高值化利用重点实验室 2026年博士人才招聘通告
+1/953
-
坐标北京，诚征女友
+2/396
-
山东征女友，坐标济南
+1/174
-
华南师范大学海洋环境科学课题组招聘青年英才和博士后
+2/146
-
半导体封测的“最后一公里”，为什么越来越需要“与世隔绝”的环境？
+1/93
-
中科院二区期刊Gels 组稿
+1/81
-
武汉工程大学（省属一本）招聘师资博士后以及人才引进教师（事业编）
+1/78
-
兰州新区化工产业招商引资
+1/76
-
南京农业大学工学院博士招生 1个名额
+1/72
-
【通知】北京信息科技大学仪器科学与光电工程学院招收博士研究生（2026）
+2/40
-
【26.9月入学】211大学补招学博1人
+1/20
-
【急招】 北京工业大学 能动第二批博士申请-杰青课题组1-2名额，25日截止！！
+1/12
-
11
+1/11
-
【博士招生】武汉科技大学招收材料、化工、环境、冶金类2026年“申请-考核”制博士生
+1/11
-
深圳大学物理与光电工程学院/深圳先进光源研究院招收2026级联合培养博士生
+1/9
-
地大武汉（211）招生光刻胶半导体方向博士生
+1/4
-
【皇家墨尔本理工大学】招大模型安全博士
+1/4
-
求助专利一篇，谢谢
+1/3
-
深圳理工大学核酸药物递送与干细胞工程课题组科研助理教授和博士后招聘启事
+1/3
-
湖南师范大学国家杰青团队急招第二批博士研究生
+1/1
2楼2011-05-19 18:24:07
3楼2011-05-19 19:21:55
4楼2011-05-19 19:43:31
5楼2011-05-19 22:07:54
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
361440594(金币+1):谢谢参与
361440594(金币+10): 2011-05-20 08:24:43
dhd997(金币+6, EPI+1): good 2011-05-20 08:28:34
361440594(金币+1):谢谢参与
361440594(金币+10): 2011-05-20 08:24:43
dhd997(金币+6, EPI+1): good 2011-05-20 08:28:34
|
培养细胞常用固定剂有4％多聚甲醛磷酸缓冲液、丙酮、甲醇和95％乙醇。在固定之前需用37℃预热的PBS轻洗细胞。 1．4％多聚甲醛磷酸缓冲液 固定10—20分钟，干燥。 2．甲醇 10‰甲醇固定5—20分钟，自然干燥。 3．丙酮 4℃冷丙酮固定组织穿透性和脱水性强，抗原保存好，很少用于组织切片，常用于培养细胞和细胞涂片的固定，平时丙酮4℃低温保存备用，临用时，将载玻片插入冷丙酮内5～10分钟，取出后自然于燥。 4．乙醇 95％乙醇脱水性强，易引起组织收缩、变硬，影响切片质量，因而固定时间不宜过长(2小时内)。乙醇使蛋白变性程度轻，固定后蛋白可再溶解，在染色中孵育时间长的情况下，抗原可流失，并减弱反应强度。 5．乙醚(或三氯甲烷) 与乙醇等量混合对组织穿透性极强，即使涂片上含较多的黏液，固定效果仍较好，是理想的细胞固定液。 培养细胞固定之后晾干可使细胞牢固地黏附在载玻片上，故对于容易脱落的细胞应延长晾干时间。晾干之后PBS漂洗3次，然后进行组织化学或免疫组织化学染色。 用于免疫组织化学的固定剂种类很多，不同的抗原和标本均可首选醛类固定液，如效果不佳，再试用其他固定液。选择最佳固定液的标准：一是能最好地保持组织细胞的形态结构；二是最大限度地保存抗原免疫活性和被检物不被丢失。 |
6楼2011-05-20 06:25:40
7楼2011-05-20 08:28:28
8楼2011-05-26 21:27:48
9楼2011-06-26 22:15:47