应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 细胞问题
91/1返回列表
查看: 1346  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看

361440594

木虫 (小有名气)

[交流] 细胞问题

有谁知道细胞的固定方法还有哪些？（除了用适体固定和用玻璃固定）最好附上方法或文献！
   还有谁知道BGC细胞是贴壁细胞吗？如果用缓冲液洗的话会不会被冲掉？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

【分子生物】EPI帖

» 猜你喜欢

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2011-05-19 14:57:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)
★ ★ ★
361440594(金币+1):谢谢参与
1949stone(金币+2): 自己动手 丰衣足食 2011-05-19 18:26:42
361440594(金币+10): 谢谢 2011-05-19 19:22:10
回答你第二个问题。不会被洗掉，绝对的贴壁。想让他掉，必须消化。
至于第一个问题，就下你说的，查文献吧。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-05-19 18:24:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

361440594

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2011-05-19 18:24:07:
回答你第二个问题。不会被洗掉，绝对的贴壁。想让他掉，必须消化。
至于第一个问题，就下你说的，查文献吧。

什么是消化？小弟第一次做细胞方面的东西？还有问你一下，BGC细胞有DNA适体吗？（就是可以和细胞表面结合的DNA链）？
赞一下 回复此楼
3楼2011-05-19 19:21:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dhd997

荣誉版主 (文坛精英)
细胞培养知识还不懂？你周围的人没有做的吗？空说很难说清楚。
赞一下 回复此楼
4楼2011-05-19 19:43:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

361440594

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by dhd997 at 2011-05-19 19:43:31:
细胞培养知识还不懂？你周围的人没有做的吗？空说很难说清楚。

没啊，所以很苦恼嘛！
赞一下 回复此楼
5楼2011-05-19 22:07:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cdl007

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
361440594(金币+1):谢谢参与
361440594(金币+10): 2011-05-20 08:24:43
dhd997(金币+6, EPI+1): good 2011-05-20 08:28:34
培养细胞常用固定剂有4％多聚甲醛磷酸缓冲液、丙酮、甲醇和95％乙醇。在固定之前需用37℃预热的PBS轻洗细胞。
1．4％多聚甲醛磷酸缓冲液  固定10—20分钟，干燥。

    2．甲醇  10‰甲醇固定5—20分钟，自然干燥。

    3．丙酮  4℃冷丙酮固定组织穿透性和脱水性强，抗原保存好，很少用于组织切片，常用于培养细胞和细胞涂片的固定，平时丙酮4℃低温保存备用，临用时，将载玻片插入冷丙酮内5～10分钟，取出后自然于燥。

    4．乙醇  95％乙醇脱水性强，易引起组织收缩、变硬，影响切片质量，因而固定时间不宜过长(2小时内)。乙醇使蛋白变性程度轻，固定后蛋白可再溶解，在染色中孵育时间长的情况下，抗原可流失，并减弱反应强度。

    5．乙醚(或三氯甲烷)  与乙醇等量混合对组织穿透性极强，即使涂片上含较多的黏液，固定效果仍较好，是理想的细胞固定液。

    培养细胞固定之后晾干可使细胞牢固地黏附在载玻片上，故对于容易脱落的细胞应延长晾干时间。晾干之后PBS漂洗3次，然后进行组织化学或免疫组织化学染色。

    用于免疫组织化学的固定剂种类很多，不同的抗原和标本均可首选醛类固定液，如效果不佳，再试用其他固定液。选择最佳固定液的标准：一是能最好地保持组织细胞的形态结构；二是最大限度地保存抗原免疫活性和被检物不被丢失。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-05-20 06:25:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

361440594

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cdl007 at 2011-05-20 06:25:40:
培养细胞常用固定剂有4％多聚甲醛磷酸缓冲液、丙酮、甲醇和95％乙醇。在固定之前需用37℃预热的PBS轻洗细胞。
1．4％多聚甲醛磷酸缓冲液  固定10—20分钟，干燥。

    2．甲醇  10‰甲醇固定5—20分钟，自然 ...

你说的这几种方法不会影响细胞及其表面的生物活性吧，比如我要在细胞表面接上DNA适体或引物之类的，不会受到影响吧?
赞一下 回复此楼
7楼2011-05-20 08:28:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

361440594

木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by cdl007 at 2011-05-20 06:25:40:
培养细胞常用固定剂有4％多聚甲醛磷酸缓冲液、丙酮、甲醇和95％乙醇。在固定之前需用37℃预热的PBS轻洗细胞。
1．4％多聚甲醛磷酸缓冲液  固定10—20分钟，干燥。

    2．甲醇  10‰甲醇固定5—20分钟，自然 ...

对Ramos细胞，最好的固定液是哪种？
赞一下 回复此楼
8楼2011-05-26 21:27:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蝈_屯

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
361440594(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-06-27 17:19:04
消化时需用消化酶，这样理解起来就容易了吧，比如说可以把组织消化成细胞
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2011-06-26 22:15:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 361440594 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +4 晨昏线与星海 2026-03-20 4/200 2026-03-25 10:16 by allen-yin
[考研] 化工专硕求调剂 +3 question挽风 2026-03-24 3/150 2026-03-24 18:48 by jhhcooi
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 7/350 2026-03-24 15:24 by cuifj
[考研] 305分求调剂（食品工程） +5 Sxy112 2026-03-21 7/350 2026-03-24 12:27 by 544594351
[考研] 一志愿吉大化学322求调剂 +4 17501029541 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:21 by 戴围脖的小蚊子
[考研] 工科0856求调剂 +5 沐析汀汀 2026-03-21 5/250 2026-03-23 17:56 by 海瑟薇-
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +3 Promise-jyl 2026-03-23 3/150 2026-03-23 13:43 by wangkm
[考研] 一志愿070300浙大化学358分，求调剂！ +4 酥酥鱼.. 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:12 by Iveryant
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 考研调剂 +4 来好运来来来 2026-03-21 4/200 2026-03-22 12:15 by 星空星月
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 一志愿南大，0703化学，分数336，求调剂 +3 收到VS 2026-03-21 3/150 2026-03-21 18:42 by 学员8dgXkO
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 330求调剂0854 +3 assdll 2026-03-21 3/150 2026-03-21 13:01 by 搏击518
[考研] 261求B区调剂，科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭