应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助，PCR的电泳结果出了未知问题
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
52/1返回列表
查看: 2255  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yanyuyu

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助，PCR的电泳结果出了未知问题

这是我电泳的条带，应该在700BP和550BP出目的带，结果在最下面有很严重的拖尾，目的条带看不出来，请问各位大侠是什么原因？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2011-05-19 10:05:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

疯狂修行者

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
Originally posted by yanyuyu at 2011-05-19 10:05:42:
这是我电泳的条带，应该在700BP和550BP出目的带，结果在最下面有很严重的拖尾，目的条带看不出来，请问各位大侠是什么原因？

你的Marker是多大的？第一个好像有点东西
看其他结果，就是没P出来。
这种情况可能会有许多原因：
（1）引物不适合，可能是引物设计时就有问题，不能扩增出目的条带，或者引物合成有问题（公司有时候会搞错的，要好好对对序列）
（2）模板的问题，模板降解或者没有成功提取出来，或者反转录的RNA降解了等
（3）反应体系的问题，反应体系中，Taq酶是非常关键的，不同PCR根据实验要求选用不同Taq酶；另外就是反应体系，各个成分的加入量，主要是模板、Taq酶和Mg离子的量的不同，这个要进行优化的。
（4）在就是反应条件了，大家一般都强调退火温度，其实还有各部反应时间，也是挺重要的，这里就不具体讲了。
祝你试验顺利，在有问题，可以联系我。
赞一下 回复此楼
戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
11楼2011-05-21 19:12:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

beautybanana

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-05-19 12:33:00
1949stone(金币+2): 越看越有道理 2011-05-19 12:34:16
引用回帖:
Originally posted by yanyuyu at 2011-05-19 10:05:42:
这是我电泳的条带，应该在700BP和550BP出目的带，结果在最下面有很严重的拖尾，目的条带看不出来，请问各位大侠是什么原因？

在750bp和500bp（DL2000的marker是吧）处没有目的条带，没有扩增出产物，可能是引物或是PCR程序问题，再仔细核对下~做个温度梯度，不行的话就检查下引物的特异性了~
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-05-19 11:01:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

【答案】应助回帖

1949stone(EPI+1): 来了 2011-05-19 12:31:59
marker 标记一下。
没有条带原因太多了：

1：PCR体系的问题 不知道你有没有进行温度梯度的设定呢？还有你的体系是怎么样的？
2：引物的退火温度和稀释的均匀程度也会影响PCR的效果。

重复做一次。
赞一下(1人) 回复此楼
Whenever,Wherever,Anyway!MustRemember:Fight!KeepFighting!NeverGiveUp!
3楼2011-05-19 11:55:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

奔跑的西瓜

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
1949stone(金币+2): 鼓励 2011-05-19 12:33:14
1949stone: 是非特异性 貌似 2011-05-19 12:33:47
貌似是降解了，你检下你的模板DNA吧，看看怎么样，或者是引物非特异性结合了
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-05-19 12:23:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 277跪求调剂 +5 1915668 2026-03-27 8/400 2026-03-27 19:53 by WYUMater
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 调剂求收留 +7 果然有我 2026-03-26 7/350 2026-03-27 00:26 by wxiongid
[考研] 349求调剂 +4 李木子啊哈哈 2026-03-25 4/200 2026-03-26 22:49 by fmesaito
[考研] 324求调剂 +4 wysyjs25 2026-03-21 4/200 2026-03-26 20:38 by fmesaito
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +17 RichLi_ 2026-03-25 17/850 2026-03-26 19:44 by plmuchong
[考研] 289求调剂 +17 硕星赴 2026-03-23 17/850 2026-03-26 16:18 by 不吃魚的貓
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 340求调剂 +5 话梅糖111 2026-03-24 5/250 2026-03-25 06:53 by ilovexiaobin
[考研] 一志愿南航材料专317分求调剂 +5 炸呀炸呀炸薯条 2026-03-23 5/250 2026-03-24 16:52 by 星空星月
[考研] 环境学硕288求调剂 +8 皮皮皮123456 2026-03-22 8/400 2026-03-23 23:47 by 热情沙漠
[考研] 一志愿国科过程所081700，274求调剂 +3 三水研0水立方 2026-03-23 3/150 2026-03-23 23:11 by MajorWen
[考研] 328求调剂 +4 LHHL66 2026-03-23 4/200 2026-03-23 14:55 by lbsjt
[考研] 276求调剂 +3 YNRYG 2026-03-21 4/200 2026-03-23 08:31 by 醉在风里
[考研] 一志愿东华大学化学070300，求调剂 +7 2117205181 2026-03-21 8/400 2026-03-22 22:55 by chixmc
[考研] 315分，诚求调剂，材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭